Цитогенетическое исследование материала абортуса

Цитогенетика и пренатальная диагностика

Хромосомы – основной носитель генной информации – определяют почти все наследственные признаки человека. От того, насколько правильным и полным будет хромосомный набор плода, зависит здоровье, а часто и жизнь будущего малыша.

Совокупность признаков (число, размеры, форма) полного набора хромосом человека называется его кариотипом. Выявить возможные нарушения и предотвратить риски помогает процедура кариотипирования – определения кариотипа, которую проводят с помощью цитогенетических методов.

На протяжении всей жизни кариотип не меняется, поэтому достаточно определить его всего один раз.

Генетик как страховка от неудачи

Визит к врачу-генетику давно стал неотъемлемой частью планирования беременности в ведущих медицинских учреждениях мира. На консультации специалист определяет, принадлежит ли семья будущих родителей к группе риска с точки зрения возможного появления генетических аномалий.

Перед визитом стоит устроить краткий опрос родственников и уточнить, были ли в семье эпизоды выкидышей или бесплодия, а также рождения детей с врожденными пороками развития.

Такая информация позволит предварительно сориентироваться, насколько высока вероятность наличия наследственных заболеваний и передачи их детям.

Каждый из таких генетических недугов сопровождается десятками серьезных симптомов: у человека меняются пропорции лица и тела, отмечается отставание в психическом или умственном развитии.

Поэтому врачи стараются по возможности исключить все наследственные риски еще на этапе планирования беременности.

Не менее важно проконсультироваться с генетиком, если пара столкнулась с репродуктивными проблемами. Самые распространенные причины обращения к генетикам-репродуктологам – невозможность зачать ребенка в течение долгого времени или так называемое «привычное невынашивание», когда женщина теряет три или более клинически подтвержденных беременности.

Согласно исследованиям российских и французских медиков, у пар с репродуктивными проблемами с частотой от 4,3% до 9,6% обнаруживаются хромосомные аномалии. В семьях, где встречаются множественные врожденные пороки развития, подобные нарушения встречаются в 5-15% случаев.

Генетические аномалии, прежде всего – на хромосомном уровне, также вызывают значительную часть самопроизвольных выкидышей на ранних сроках. С точки зрения экспертов,  это также наиболее частая  причина замершей беременности.

Цифры

0,5% новорожденных, по данным Всемирной организации здравоохранения, имеют различные пороки развития, вызванные патологией хромосом

Около 400 тыс. человек составляет в России число больных с хромосомными нарушениями

Как найти источник сбоя

Чтобы определить, где и на каком этапе происходит сбой, необходимо провести процедуру кариотипирования, которое выявит числовые и структурные отклонения в хромосомном наборе. В зависимости от анамнеза и предполагаемых рисков, исследуется кариотип родителей или плода.

Своевременное исследование кариотипа плода необходимо для точного прогноза и разработки рекомендаций для семей при самопроизвольных выкидышах и неразвивающейся беременности, поскольку в этих случаях частота хромосомных нарушений в I триместре беременности достигает по различным данным от 55% до 70%.

Цитогенетический анализ кариотипа абортуса позволяет определить, являются ли хромосомные аномалии причиной гибели плода.

Например, около 2% беременности прерывается из-за дефекта, называемого триплодией: каждая хромосома присутствует не в двух, а в трех экземплярах.

Дефект возникает, если хромосомы неправильно разошлись в процессе развития яйцеклетки, или же ее оплодотворили одновременно два сперматозоида.

Самопроизвольное прерывание из-за триплодий, как правило, происходит еще до того, как можно диагностировать какие-то отклонения. Поэтому важно провести генетическое исследование плода при замершей беременности.

Обнаружение триплодии в случае замершей беременности или выкидыша – хорошая новость для супругов. Риск повторения этой аномалии у тех же родителей считается крайне низким.

Показания для проведения кариотипирования

• Возраст родителей: после 35 лет у женщин и 40-45 лет у мужчин возрастает риск зачать ребенка с хромосомными аномалиями.
• Подозрение на наличие наследственных заболеваний в семье: у родителей или среди родственников были случаи врожденных дефектов, были выявлены пороки развития плода во время неудачных беременностей.
• Отмечены репродуктивные проблемы: проверка кариотипа назначается в случаях привычного невынашивания, бесплодия неясного генеза, аменореи или нарушений сперматогенеза.
• Имеется подозрение на аномалии плода: при обнаружении тревожных признаков на УЗИ или в анализах беременной женщины исследование кариотипа позволяет прояснить ситуацию.
• Неразвивающаяся беременность: цитогенетический анализ абортуса позволяет выявить, являются ли хромосомные аномалии причиной остановки разития плода.

Хромосомы: век под микроскопом

Хромосомы, исследуемые в ходе кариотипирования, являются основными структурами ядра клетки. Именно в них умещается основной массив генетической информации, передающейся по наследству. Эти элементы представляют собой плотно скрученные нити ДНК, способные самовоспроизводиться и задавать определенные признаки или механизмы работы человеческого организма.

На каждой хромосоме умещается больше 500 различных генов, и, если повреждена целая хромосома или хотя бы ее фрагмент, может возникнуть колоссальный объем сбоев.

Цитогенетика – а этот термин впервые применили еще в 1903 году —  занимается исследованием хромосом, их деятельности и механизмов наследования.

Классический цитогенетический анализ предполагает изучение материала в двух аспектах – исследование хромосом и анализ наследования генетических признаков.

И если на генетической карте хромосом отражена только схема линейного расположения генов, то на цитогенетической гены соотнесены с конкретными участками и элементами хромосом.

Сегодня для кариотипирования подходят практически любые популяции делящихся клеток. Добавляя стимулятор к биоматериалу, генетики добиваются увеличения числа клеток. После этого в лаборатории окрашивают элементы метафазных хромосом и изучают их под микроскопом.

Поскольку красители проникают неравномерно, то в процессе исследования хромосомы представляют собой полосчатые структуры.

При спектральном кариотипировании, которое проводится при помощи FISH-метода, хромосомы окрашиваются набором флуоресцентных красителей, которые «привязываются» к специфическим участкам хромосом. Анализ флуоресцентными методами помогает обнаружить несколько аномальных клеток среди тысячи абсолютно нормальных.

Кариотипирование – от первых планов до третьего триместра

Существует несколько основных видов кариотипирования, каждый из которых призван исключить появление генных аномалий на определенном этапе планирования и ведения беременности.

Кариотипирование родителей желательно провести до зачатия ребенка. Процедура проста и практически безболезненна, требуется всего несколько миллилитров периферической крови. Специальной подготовки анализ не требует.

Если по тем или иным причинам будущие мама и малыш находятся в группе риска с точки зрения развития хромосомных аномалий, назначается кариотипирование плода.

На 10-12 неделях беременности диагностика хромосомных патологий предполагает исследование ворсин хориона. Внешняя оболочка плода, покрытая ворсинами, плотно прилегает к матке изнутри.

Примерно к 16 неделе она полностью преобразуется в плаценту, но пока, будучи тканями плодного происхождения, хорион несет в себе информацию о хромосомном наборе будущего малыша, что позволяет обнаружить возможные нарушения генетики плода.

При внимательном и непрерывном УЗИ-контроле для взятия пробы через брюшную стенку вводят тончайшие щипцы или катетер. Обычно забирают не более 5 мл биоматериала. Процедура практически не несет в себе угрозы выкидыша.

Ворсины хориона также изучаются в рамках исследования абортного материала при выкидышах или при «замирании плода» (замершей беременности).

Материалом для изучения кариотипа может служить и амниотическая жидкость, проще говоря – околоплодные воды. В них также содержатся клетки, по которым определяется кариотип. Оптимальным сроком для процедуры амниоцентеза считаются 16-20 недели.

Практически все указанные виды исследований опираются не только на высокотехнологичное аналитическое оборудование, но и на квалификацию специалистов лаборатории. Сегодня в «ПрогрессЛаб» работают одни из лучших цитогенетиков Москвы, что гарантирует точные и своевременные результаты кариотипирования будущим родителям.

ЗАКАЗАТЬ ДИАГНОСТИКУ

Источник: https://progress-lab.ru/citogen/

Что такое цитогенетическое исследование?

Современная медицина может предложить будущим родителям не только узнать пол ребенка и увидеть его черты лица, но и заранее определить, какие болезни ждут их отпрыска в будущем. Помогает в этом цитогенетическое исследование.

Для его проведения достаточно нескольких миллилитров крови или любой другой жидкости/ткани плода. После проведения сложных химических и физических манипуляций с материалом врач-генетик может дать ответы на интересующие семью вопросы.

Определение

Цитогенетическое исследование – это микробиологическое исследование генетического материала человека с целью выявления генных, хромосомных или митохондриальных мутаций, а также онкологических заболеваний. Значение этого исследования определяется доступностью клеток для кариотипирования и изучения происходящих в них изменений.

Внешний вид молекулы ДНК в ядре клетки сильно варьируется в зависимости от фазы клеточного цикла. Для того чтобы провести анализ, необходимо, чтобы произошла конъюгация хромосом, которая бывает в метафазе мейоза.

При качественном заборе материала каждая хромосома видна как две отдельные хроматиды, расположенные в центре клетки. Это идеальный вариант, чтобы провести цитогенетическое исследование.

Кариотип человека в норме состоит из 22 пар аутосом и двух половых хромосом. У женщин это ХХ, а у мужчин — ХУ.

Цитологическое исследование проводится при наличии конкретных показаний как со стороны родителей, так и со стороны ребенка:

— мужское бесплодие; — первичная аменорея; — привычное невынашивание беременности; — мертворождение в анамнезе; — наличие детей с хромосомными аномалиями; — наличие детей с пороками развития; — перед процедурой экстракорпорального оплодотворения (ЭКО);

— наличие в анамнезе неудачных ЭКО.

Для плода существуют отдельные показания:

— наличие у родившегося ребенка пороков развития; — умственная отсталость; — задержка психомоторного развития;

— аномалии пола.

Исследование крови и костного мозга

Цитогенетическое исследование крови и костного мозга проводится для определения кариотипа, выявления количественных и качественных нарушений в структуре хромосом, а также подтверждения онкологического заболевания.

Клетки крови с ядрами (лейкоциты) культивируют в питательной среде трое суток, затем фиксируют полученный материал на предметном стекле и изучают под микроскопом.

Для анализа костного мозга необходимо получить из биоптата не менее двадцати клеток. Забор материала должен проводиться только в условиях лечебного учреждения, так как процедура болезненная, а кроме того, необходимы стерильные условия для предупреждения инфицирования места пункции.

Исследование плода

Цитогенетическое исследование плода назначается врачом-генетиком после консультации супружеской пары. Существует несколько вариантов забора материала для этого анализа. Самый ранний – это биопсия плаценты. Забор материала на цитогенетическое исследование хориона проводится трансвагинально, под контролем УЗИ.

Аспирационной иглой берется несколько ворсинок будущей плаценты, которые уже содержат ДНК эмбриона. Процедуру можно проводить с 10-й недели беременности. Начиная с третьего месяца разрешается делать амниоцентез.

Это аспирация околоплодных вод, где находятся клетки эпителия плода, которые можно использовать как материал для исследования.

Третий вариант – кордоцентез. Данная процедура может навредить ребенку, поэтому показания должны быть достаточно вескими. Через переднюю брюшную стенку в амниотический пузырь вводится игла, которая затем должна попасть в вену пуповины и забрать часть крови. Вся процедура проводится под УЗИ-контролем.

С помощью этих методов можно определить моногенные, хромосомные и митохондриальные патологии будущего ребенка и принять решение о продлении либо прерывании беременности.

Анализ опухолевых клеток

Молекулярно-цитогенетическое исследование хромосом раковых клеток затруднено из-за их морфологических изменений, а также плохой различимости полос. Это может быть транслокация, делеция и т. д.

На современном уровне для исследования таких образцов используют гибридизацию in situ (т. е. «на месте»). Это позволяет выявить местоположение хромосом в любой молекуле ДНК или РНК. Можно таким образом искать и маркеры других заболеваний.

загвоздка состоит именно в маркерах онкологических заболеваний, так как в каждом конкретном случае необходимо приготовить индивидуальную последовательность нуклеотидов и размножить ее. Затем, после накопления достаточного количества исследуемой ДНК, проводится, собственно, гибридизация. В конце нужно отделить участки, которые были выявлены, и сделать вывод о результатах исследования.

Виды нарушения хромосом

На сегодняшний день насчитывают несколько видов хромосомных нарушений:

— моносомии – наличие только одной хромосомы из пары (болезнь Шерешевского — Тернера); — трисомии – добавление еще одной хромосомы (сидром суперженщины и супермужчины, Дауна, Патау, Эдвардса); — делеция – удаление участка хромосомы (мозаичные формы хромосомных патологий); — дупликация – дублирование определенного участка хромосомного плеча; — инверсия – поворот участка хромосомы на сто восемьдесят градусов;

— транслокация – перенос участков генома с одной хромосомы на другую.

Структурные нарушения хромосом передаются следующему поколению и могут накапливаться, поэтому возрастает риск рождения больных детей. Материал цитогенетических исследований тщательно изучается на предмет наличия повреждений, и по нему делается заключение о состоянии всего организма.

Клиническое значение

Клетка, которая имеет приобретенную или врожденную аномалию, может стать предшественницей целого клана клеток, которые сформируют опухоль или стигму дисэмбриогенеза.

Своевременное их обнаружение способствует ранней постановке диагноза и принятию решения о дальнейшей тактике лечения.

Цитогенетическое исследование дало возможность многим супружеским парам, имеющим дефектные рецессивные гены, родить здоровых детей либо, если это невозможно, задуматься о процедуре ЭКО и суррогатном материнстве.

Источник: https://FB.ru/article/272505/chto-takoe-tsitogeneticheskoe-issledovanie

Цитогенетическое исследование и молекулярное кариотипирование | Многопрофильная медицинская клиника

Консультация гинеколога-репродуктолога – БЕСПЛАТНО

1. МАТЕРИАЛ ИССЛЕДОВАНИЯ – МАТЕРИАЛ АБОРТУСА. 

Собирается при чистке замершей беременности (или анэмбрионии)- это ворсинки хориона, ткани плаценты.

Цель исследования –  кариотипирование – исследования хромосом под микроскопом: количество, размеры и морфологические особенности.

Ряд хромосомных заболеваний можно диагностировать по изменению количества хромосом, или по любым другим внутрихромосомным и междухромосомным перестройкам. Любые отклонения от нормы могут стать причиной замирания беременности и аномалий.

Информацию о генетическом коде и возможных мутациях несут ворсинки хориона – ткани плаценты, полученные после выскабливания матки. Если причины остановки развития эмбриона имеют генетическую природу, исследование безошибочно покажет, в какой хромосомной паре возникают нарушения. Важно наличие ворсин хориона в  биоматериале.

Только при вакуум-аспирации или выскабливании замершей беременности (анэмбрионии) возможно полноценно взять биоматериал для генетического исследования.

В случае же медикаментозного аборта собрать материал абортуса (сгустки) возможно, но гарантировать наличие ворсин хориона в нем, по которым проводится генетическое исследование, не всегда представляется возможным.

В случае отсутствия ворсин хориона исследование  провести невозможно.

Материал собирается строго!!! по инструкции. Методикой сбора биоматериала для генетического исследования владеет хирург, производящий  операцию.

Возможны следующие виды генетических исследований материала абортуса:

–цитогенетическое исследование живого клеточного материала (проводится до 14-15 нед. беременности; исследование должно начаться не позже 24 часов после получения биоматериала абортуса с целью сохранения жизнеспособности клетки);

–молекулярно-генетическое исследование по ДНК (срок беременности, как и время проведения исследования значения не имеют).

Методика цитогенетического исследования

Анализ проводится мтодом метафазных пластинок, препараты которых получают из клеток цитотрофобласта ворсинчатого хориона ускоренным “прямым” методом.

Из пробы извлекаются одноядерные лейкоциты и к ним добавляют делящиеся клетки. Исследуются под микроскопом клетки, полученные после остановки этапа деления.

Клетки окрашиваются специальным красителем, фотографируются и исследуются хромосомы под микроскопом.

Показатели нормы:           1. У мужчин – 46 XY         2. У женщин – 46 ХХ

Стоимость цитогенетического исследования в клинике “Медсервис”

!!! Важно для сторонних организаций: при сдаче биматериала на цитогенетическое исследование (памятка врачу, как осуществлять забор, прилагается) заполняются анкета и и информированное согласие и вместе с материалом абортуса предоставляются в клинику “Медсервис, соблюдая режим холодильника.

Для цитогенетического исследования важно, чтобы клетки биоматериала были живыми. Чтобы обезопасить себя от невозможности провести исследование на «живом» клеточном материале (его может не быть в материале абортуса  по разным причинам) прибегают к методу молекулярного кариотипирования, исследуя ДНК. При этом сохранность клеток в живом состоянии не важна.

Кроме этого сам метод имеет ограничения. Если исследования показывает мужской кариотип, то полученный результат относится к эмбриону, если женский, то результат может относится как к эмбриону, так и матери.

Дальнейшая врачебная тактика заключается в генетическом обследовании матери. При молекулярном генетическом исследовании это исключено, так как исследование идет по ДНК, которая для каждого человека индивидуальна.

Молекулярное кариотипирование материала абортуса

Для проведения исследования используется ДНК, выделенная из биоматериала, а не клеточная культура, как в цитогенетическом исследовании.

Это снижает риск влияния качества биоматериала на возможность проведения анализа (клетки абортивного материала могут не сохранить жизнеспособность внутриутробно и в условиях забора) и исключает в случае женского кариотипа неоднозначность принадлежности исследования  матери или эмбриону.

Возможно молекулярно-генетическое исследование без предоставления крови матери, тогда исследование будет направлено на выявление анеуплоидий методом секвенирования нового поколения (NGS).  Данное исследование выявляет распространенные генетические нарушения кариотипа. Охват остальных патологий генома у данного анализа занимает около 40%, что является ограничением данной методики.

Стоимость молекулярно-генетических исследований в клинике “Медсервис”

!!! Важно для сторонних организаций: при сдаче анализов на молекулярное исследование материала абортуса заполняются анкета и и информированное согласие, берется кровь матери в пробирку К2Е К2EDTA с фиолетовой крышкой  и все вместе предоставляется в клинику “Медсервис”, соблюдая режим холодильника.

2. МАТЕРИАЛ ИССЛЕДОВАНИЯ – ВЕНОЗНАЯ КРОВЬ ЧЕЛОВЕКА

Цель исследования – выявление нарушений хромосомного набора человека при планировании беременности. Устанавливается генетическую совместимость партнеров.

Цитогенетическое исследование также необходимо при:

• бесплодии
• наличии у одного из супругов генетических патологий
• невынашиваемости беременности
• нарушении полового развития
• возрастным беременным – старше 35 лет;
• рождении ребенка с наличием генетической патологии

 Позвонить онлайн           Записаться на приём

Источник: https://ooomedservis.ru/analizy/citogeneticheskoe-issledovanie/