Необходимость ПГС перед ЭКО

Все, что нужно знать об экстракорпоральном оплодотворении (ЭКО)

Не секрет, что пары, безуспешно пытающиеся завести ребенка, готовы пойти на многое, чтобы наконец познать радость родительства.

Многим из них кажется, что ЭКО — это чудесный шанс, единственный для них.

Но многие ли знают, как проводится процедура ЭКО? Насколько это сложно или опасно? Каков шанс на зачатие с первой попытки? Какие исследования нужно пройти перед процедурой?

В нашей статье мы дадим ответы на все эти вопросы.

Что такое ЭКО

Экстракорпоральное оплодотворение — это метод вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), при котором оплодотворение яйцеклетки происходит в лабораторных условиях, а затем уже развивающийся эмбрион переносят в полость матки будущей мамы (или суррогатной матери).

25 июля 1978 года ознаменовало новую эру в истории лечения бесплодия: на свет появилась Луиза Браун — первый ребенок, родившийся благодаря ЭКО. Прошло 40 лет и сегодня таких детей во всем мире более 5 миллионов.

С помощью ЭКО рождаются дети у пар, которые были ранее обречены на бесплодие (при отсутствии или полной непроходимости маточных труб, при малой концентрации или плохой подвижности сперматозоидов мужа и т.д.). Но даже этот метод не может гарантировать беременность.

Точную причину неудачи не всегда можно установить. Но доказано, что огромное значение имеет возраст женщины.

И если вопрос об ЭКО по какой-то причине не поднимался врачом или необоснованно откладывался пациентом, то приближающийся 40-летний рубеж возраста должен являться дополнительным стимулом для лечащего врача настоятельно рекомендовать пациенту методы ВРТ, в том числе и ЭКО.

С недавнего времени экстракорпоральное оплодотворение входит в программу ОМС, то есть может проводиться бесплатно при наличии показаний и после оформления необходимых документов.

При этом на бесплатную процедуру могут претендовать как пары, так и женщины без партнера. Среднее время ожидания очереди зависит от региона и составляет от нескольких месяцев до 1,5–2 лет.

Если стоять в очереди годами не хочется, то можно обратиться в частный медицинский центр.

Когда назначается процедура

На проведение ЭКО могут претендовать пары с бесплодием, не поддающимся лечению консервативным или хирургическим (лапароскопическим) методом.

Показания к ЭКО.

1. Женский фактор:

• непроходимость или отсутствие маточных труб (нет шанса встречи яйцеклетки и сперматозоида и, соответственно, нет шанса забеременеть естественным путем);
• синдром поликистозных яичников, при котором нарушается процесс своевременного созревания фолликула и овуляции (яйцеклетка остается внутри нелопнувшего фолликула из-за его утолщенной оболочки);
• эндометриоз;
• порок развития маточных труб;
• эндокринное бесплодие, при котором нарушен процесс созревания фолликулов в яичниках или овуляция;
• иммунологические проблемы, затрудняющие процесс движения сперматозоидов из влагалища к яйцеклетке (встреча сперматозоида и яйцеклетки в естественных условиях происходит в маточной трубе) или процесс проникновения сперматозоида через оболочки яйцеклетки внутрь ее цитоплазмы.

2. Мужской фактор:

• олигозооспермия — критическое снижение количества сперматозоидов в эякуляте (проблема решается обработкой спермы для увеличения концентрации сперматозоидов или методом Эко с икси — введением сперматозоида непосредственно в яйцеклетку);
• астенозооспермия — пониженная подвижность сперматозоидов (проблема решается методом Эко с икси);
• азооспермия — полное отсутствие сперматозоидов в семенной жидкости (в этом случае остается возможность извлечь сперматозоиды хирургическим путем из придатка яичка или яичка и использовать их в программе Эко с икси);
• ретроградная эякуляция. Сперма при эякуляции забрасывается в мочевой пузырь мужчины (сперматозоиды извлекаются из мочи).

3. Идиопатическое бесплодие — бесплодие неясного генеза. При обследовании супружеской пары не удается определить причину бесплодия.

Когда экстракорпоральное оплодотворение противопоказано

В большинстве случаев вопрос о возможности применения этого метода ВРТ врач решает индивидуально. Однако существуют абсолютные противопоказания к ЭКО, закрепленные в приказе Минздрава России от 30 августа 2012 года №107н «О порядке использования вспомогательных репродуктивных технологий, противопоказаниях и ограничениях к их применению». К ним относятся:

• туберкулез и туберкулезный перикардит;
• острые гепатиты A, B, C, D, G, а также хронический гепатит в стадии обострения;
• болезнь, вызванная ВИЧ (в инкубационной, терминальной стадии или в стадии проявлений);
• сифилис;
• злокачественные новообразования;
• доброкачественные опухоли матки/яичников, требующие хирургического лечения;
• лейкозы, лимфомы, анемия и другие патологии кроветворной системы;
• некоторые формы сахарного диабета;
• тяжелые психические расстройства и заболевания нервной системы (в том числе наследственные);
• пороки сердца;
• тяжелые заболевания печени;
• врожденные пороки развития и т.д.

Перед началом ЭКО необходимо провести лечение половых инфекций, воспалительных заболеваний, других выявленных нарушений. Чем лучше будет состояние здоровья семейной пары при подготовке к ЭКО, тем выше шанс на успешную беременность.

Методы (программы) экстракорпорального оплодотворения

Существуют разные «модификации» традиционного ЭКО, которые помогают снизить риски и повысить эффективность этой процедуры.

Эко с икси

Эко с икси применяется при плохом качестве мужской спермы или если при стимуляции овуляции получено мало яйцеклеток. Также этот метод рекомендуют, если прошлые попытки ЭКО закончились неудачно. При ИКСИ врач выбирает здоровые активные сперматозоиды (рассматривая их с увеличением в 400 раз). Затем с помощью специальных микроинструментов специалист сам вводит сперматозоиды в яйцеклетки.

Эко с имси

При ИМСИ сперматозоиды рассматривают с увеличением в 6000 раз. Таким образом эмбриолог может отобрать наиболее полноценные сперматозоиды по форме, структуре и строению и использовать именно их. Это повышает вероятность успешного зачатия.

Эко с ivm

IVM — протокол, при котором не используются большие дозы гормонов. Яйцеклетки забирают из яичников в незрелом виде. Дозревают они в специальном инкубаторе.

Эко с хетчингом

Будущий эмбрион в первые дни его развития окружает достаточно плотная защитная оболочка. И на пятые сутки он должен «вылупиться» из нее, чтобы иметь возможность развиваться и прикрепиться к стенке матки.

Хетчинг — это процедура, при которой надсекают блестящую оболочку зародыша, что облегчает процесс закрепления.

Хетчинг рекомендован для женщин после 38-ми лет, при утолщении блестящей оболочки, при предыдущих неудачных попытках ЭКО.

Как подготовиться к процедуре

Подготовка к ЭКО начинается с установления причины бесплодия. Для этого проводится обследование пары, которое включает в себя:

• определение уровня гормонов у женщины;
• оценку проходимости маточных труб;
• исследование матки и эндометрия;
• анализ спермограммы;
• обследование на половые инфекции.

Этот этап в среднем длится от 1 до 3 месяцев. Еще в течение 6 месяцев проводят лечение выявленных отклонений. Если это не помогло, рекомендуют базовую программу ЭКО.

В некоторых случаях единственным методом лечения является ЭКО (другие методы лечения просто не могут помочь), и тогда к программе приступают сразу.

Перед ЭКО проводят тщательное обследование обоих партнеров на половые инфекции, ВИЧ, гепатиты. Для мужчины необходимо также сделать спермограмму.

Для женщины перечень исследований гораздо шире. Он включает в себя флюорографию, электрокардиограмму, разносторонние исследования крови и мочи, УЗИ молочных желез/маммографию, получение заключения терапевта, а при необходимости — и других специалистов: эндокринолога, генетика.

Как проводится ЭКО

Саму процедуру экстракорпорального оплодотворения можно разделить на несколько этапов.

• Стимуляция овуляции Женщина проходит курс гормональной терапии. Конкретный протокол подбирает для нее лечащий врач. Гормоны позволяют не только ускорить созревание яйцеклеток, но и получить сразу несколько ооцитов.
• Пункция фолликулов яичника Пункцию проводят под общим наркозом. С помощью УЗИ определяют расположение зрелых фолликулов и забирают из них фолликулярную жидкость с яйцеклетками в ней. При IVM забирают незрелые яйцеклетки и помещают их в питательный раствор для созревания.
• Оплодотворение яйцеклеток Из фоллулярной жидкости под контролем микроскопа отбирают яйцеклетки, переносят их в питательную среду и помещают в инкубатор при температуре 37°С и концентрации углекислого газа 5%. Эмбриолог обрабатывает сперму, извлекает из нее фракцию морфологически полноценных активно- подвижных сперматозоидов и через 4–5 часов после получения яйцеклеток добавляет сперматозоиды в пробирку к яйцеклеткам из расчета 100 тясяч сперматозоидов на яйцеклетку. При ИКСИ/ИМСИ эмбриолог вводит сперматозоид в ооцит искусственно.
• Культивирование эмбрионов Эмбрионы растут 5 дней. Здоровые эмбрионы с хорошей скоростью деления отбирают для подсадки в полость матки. До подсадки при необходимости проводится хетчинг.
• Преимплантационная генетическая диагностика (ПГД) и преимплантационный генетический скрининг (ПГС) ПГД и ПГС проводят на этапе отбора эмбрионов. Диагностика проводится в тех случаях, если у партнеров имеются генетические заболевания. Скрининг используется намного чаще. Самым распространенным показанием является возраст женщины более 40 лет.
• Перенос эмбрионов в матку Отобранные эмбрионы с помощью стерильного катетера вводят в матку будущей мамы. Обычно используют один-два эмбриона.
• Криозаморозка Если сформировалось несколько хороших эмбрионов, врач может предложить криозаморозку. Это позволяет сохранить эмбрионы на тот случай, если попытка ЭКО будет неудачной. Также можно заморозить половые клетки (сперматозоиды или яйцеклетки) и сохранить их «на будущее».
• Гормональная поддержка Две недели после переноса эмбрионов женщина принимает гормоны. Они улучшают приживаемость зародышей.
• Диагностика беременности Через 12–14 дней после пересадки эмбрионов можно точно сказать, прижились ли они. Для этого делают анализ на ХГЧ. Если беременность наступила, уровень гормона значительно повышается. Примерно на 21–22 день после переноса эмбрионов уже можно проводить УЗИ.

Какова вероятность положительных результатов после ЭКО

Эффективность программы ЭКО колеблется в среднем от 20 до 40%. В конечном итоге успех индивидуален в каждой конкретной ситуации.

В России первый малыш, рожденный после ЭКО, появился в 1986 году. Всего в России в результате ЭКО родилось уже более 40 тысяч детей. Сейчас эти дети уже сами становятся мамами и папами.

На вероятность наступления беременности влияет правильный подбор протокола стимуляции яичников, качество сперматозоидов, возраст женщины, предшествующие заболевания, в том числе гинекологические.

Чем больше факторов риска, тем сложнее получить положительный результат и выше вероятность осложнений.

Однако самым главным фактором, влияющим на успех ЭКО, является возраст: все остальные, в том числе вместе взятые, имеют меньшее значение по сравнению с ним.

Безопасен ли метод экстракорпорального оплодотворения для здоровья матери и ребенка

При ЭКО эмбрион с самого начала находится в «непривычных» условиях. Женщины, идущие на эту процедуру, обычно имеют хронические заболевания и дополнительные факторы риска. Все это с большой вероятностью может сказаться на течении беременности.

Раньше, до появления метода криоконсервации эмбрионов, в матку подсаживалось два и более эмбриона. Прежний уровень технологий ставил участников программы искусственного оплодотворения перед выбором: забеременеть с высокой вероятностью после переноса 2–8 эмбрионов или отказаться от затеи совсем. Почти все выбирали первый вариант.

Именно в результате такой тактики и возникали многоплодные беременности. При этом многоплодная беременность значительно чаще приводит к гипотрофии плода, преждевременным родам и осложнениям. По данным В.С. Корсака, д.м.н.

, президента Российской ассоциации репродукции человека, риск преждевременных родов при вынашивании двойни увеличивается примерно на 25%, а при тройне — на 46%.

Сегодня нет никаких медицинских оснований для переноса более двух эмбрионов.

Благодаря технологии криоконсервации выживаемость эмбрионов повысилась до 99,8%, а значит — и необходимость подсадки нескольких оплодотворенных клеток отпала.

В России разрешено переносить до двух эмбрионов, и только в особых случаях — до трех. А в некоторых странах запрещено законодательно переносить более одного эмбриона.

Дети, зачатые с помощью ЭКО, не отличаются от своих сверстников в развитии. Это связывают с применением более современных методов подготовки партнеров, развитием самой процедуры ЭКО, более тщательным ведением беременности.

Существует несколько способов, которые позволяют снизить риски для будущего ребенка и его матери.

• Лечение инфекций и хронических заболеваний перед процедурой ЭКО. Начинать подготовку к ЭКО нужно на фоне полного здоровья.
• Культивирование эмбрионов. Врач-эмбриолог оценивает качество эмбрионов, их строение, скорость деления клеток и переносит в полость матки только здоровые полноценные зародыши на стадии бластоцисты, то есть на 5-6 день развития.
• Широкое применение преимплантационной диагностики позволяет существенно снизить риск выкидышей, увеличить результативность ЭКО, снизить риски осложнений для детей.
• Перенос эмбрионов после восстановления организма от стимуляции яичников. Это означает разделение классической программы ЭКО на два цикла: сначала — стимуляция яичников и получение яйцеклеток, в следующем менструальном цикле, уже после восстановления организма — перенос эмбрионов.
• Ведение беременности. Из-за наличия факторов риска, как со стороны матери, так и со стороны ребенка, к ведению беременности нужно подойти особенно тщательно. Нужно выполнять все рекомендации, следить за своим питанием, за состоянием своего здоровья.

Метод экстракорпорального оплодотворения активно развивается, появляются новые программы его проведения. Открывают все больше современных медицинских центров, занимающихся проблемами бесплодия и проведением ЭКО. Все это дает многим людям надежду на рождение собственного долгожданного ребенка.

Источник: https://www.pravda.ru/navigator/protsedura-iekstrakorporal-nogo-oplodotvorenija.html

Генетическое обследование эмбрионов (ПГД, ПГС)

Когда пара с бесплодием приходит к врачу ее интересует множество вопросов. В процессе беседы может прозвучать аббревиатура ПГД.

Что это такое, для чего используется, нужно ли это именно в конкретном случае и что это даст?

Рисунок 1 Хромосомы и гены. Хромосомы — это «упакованные гены». Каждая хромосома содержит огромное количество генов. Хромосом всего 46 (23 пары). Каждые ген «закодирован» определенной последовательностью нуклеиновых кислот

Преимплантационная генетическая диагностика (ПГД)

Преимплантационная генетическая диагностика — это метод, используемый для выявления генетических дефектов у эмбрионов, полученных с помощью экстракорпорального оплодотворения (ЭКО).

Преимплантационная генетическая диагностика (ПГД) используется в случаях, когда один или оба генетических родителей имеют известную генетическую аномалию. В этом случае изучается эмбрион с целью выявления этой родительской аномалии. В основном это так называемые моногенные заболевания. Т.е.

заболевание связано с одним геном, а не с несколькими. Одно из самых часто встречающихся моногенных заболевании — это муковисцидоз (нарушение функций органов дыхания), носителем является 2-5% населения.

Чтобы заболевание проявилось необходимо чтобы встретились два носителя, при этом вероятность, что ребенок будет носителем — 50%, вероятность рождения больного, как и здорового ребенка составит — 25%. Частота рождения детей с муковисцидозом в России 1:10000.

Рисунок 2 По данным ОАО «Институт Стволовых Клеток Человека» http://www.rahr.ru/d_pech_mat_konf/schevchenko.pdf
Преимплантационная генетическая диагностика как раз и позволяет диагностировать заболевание у эмбриона еще до того, как его перенесут в полость матки.

Проводить преимплантационную генетическую диагностику всем подряд нет смысла. Это оправдано только в случае если известно, что родители либо болеют, либо являются носителями моногенного заболевания.

Таким образом, потребность в преимплантационной генетической диагностике очень маленькая и проводится не у пар, страдающих бесплодием, а у пар, где есть носительство или наличие моногенного заболевания.

На консультации по бесплодию речь идет о преимплантационном генетическом скрининге (ПГС), а не о ПГД. Просто как-то традиционно сложилось что ПГС называют ПГД.

Преимплантационный генетический скрининг (ПГС)

Преимплантационный генетический скрининг (ПГС) выполняется в случаях, когда эмбрионы от родителей с предположительно нормальным кариотипом (набором хромосом) изучаются на наличие анеуплоидии, т.е. нарушений набора хромосом. Самая частая хромосомная аномалия — трисомия по 21 паре, проявляется она в виде синдрома Дауна.

Рисунок 3 Риск рождения ребенка с синдромом Дауна в зависимости от возраста матери. NEWBERGER D. Down Syndrome: Prenatal Risk Assessment and Diagnosis. Am Fam Physician. 2000 Aug 15;62(4):825-832.

Характеристика	Трисомия 21	Трисомия 18	Трисомия 13
Эпоним	Синдром Дауна	Синдром Эдварда	Синдром Патау
Частота возникновения	1:800	1:8000	1:15000

Риск всех хромосомных аномалий растет при увеличении возраста женщины.

Поскольку только эмбрионы с отсутствием известной патологии переносят в полость матки, преимплантационная диагностика является альтернативой диагностическим процедурам, проводимым с той же целью, но уже во время беременности (амниоцентез или биопсия хориона).  При получении неудовлетворительных результатов после проведения биопсии хориона или амниоцентеза приходится принимать нелегкое решение о прерывании беременности.

В настоящее время ПГД и ПГС — это единственные доступные способы предотвращения зачатия ребенка, страдающего генетическим заболеванием. Огромный плюс этих методик, это отсутствие дилеммы прерывания уже наступившей беременности. Вся информация получается еще до наступления беременности.

Показания к преимплантационному генетическому скринингу (ПГС).

В настоящее время не существует конкретного перечня показаний для преимплантационного генетического скрининга (ПГС).

Самые ранние потери беременности связаны преимущественно с анеуплоидиями. Поскольку после ПГС, в полость матки переносят только эмбрионы с нормальным кариотипом, риск выкидышей заметно снижается.

Как правило, проведения ПГС рекомендуется в следующих группах:

• Женщины старше 35 лет
• Пары с привычным невынашиванием беременности
• Пары с повторными неудачными ЭКО
• Наличие тяжелого мужского бесплодия

У пациентов этих групп высокий риск неудачи при ЭКО из-за высокой вероятности наличия анеуплоидных эмбрионов. ПГС уменьшает этот риск, т.к. в полость матки переносят только эмбрионы с нормальным кариотипом, имеющие более высокий шанс имплантации.

Возраст женщины.

Риск анеуплоидии у детей возрастает по мере увеличения возраста женщин. Способность яйцеклетки давать нормальный эмбрион с возрастом теряется. Особенно значимо риск начинает увеличиваться после 35 лет.

Рисунок 4 Зависимость между возрастом матери и долей эмбрионов с хромосомными аномалиями.

Проведение ПГС у женщин старше 35 лет, увеличивает шанс на успешное ЭКО и, более того, резко снижает вероятность выкидышей. Собственно, шансы эмбриона с нормальным кариотипом не зависят от возраста матери.

Привычное невынашивание.

Под привычным невынашиванием понимают два и более выкидыша. В 50-80 % случаев выкидышей обнаруживают хромосомные аномалии. При привычном невынашивании доля эмбрионов с анеуплоидией еще выше. Проведение ПГС позволяет снизить частоту выкидышей, особенно в группе пациентов, где есть подтверждение анеуплоидии при предшествующих неудачных беременностях.

Повторные неудачи в ЭКО.

Под повторными неудачами в ЭКО обычно понимают 3 или более неудачных попыток ЭКО с переносом 4 и более эмбрионов высокого качества.

Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что эти пациенты имеет бОльшее количество эмбрионов с хромосомными аномалиями.    Проведение ПГС может существенно увеличить вероятность успешного ЭКО.

Но несмотря на успехи в диагностике хромосомных аномалий эмбрионов, остаются и другие причины повторных неудач, и далеко не все их них известны науке.

Наличие тяжелого мужского бесплодия

У мужчин с нарушением сперматогенеза выше вероятность того, что эмбрионы будут иметь хромосомные отклонения. У мужчин с нормальными показателями спермограммы среди сперматозоидов 3-8 % имеют хромосомные аномалии.

В то же время, у мужчин с тяжелыми нарушениями сперматогенеза (маленькая концентрация, подвижность и низкое количество сперматозоидов с нормальным строением) наличие хромосомно аномальных сперматозоидов существенно увеличивается.

Использование ИКСИ позволило преодолеть тяжелое мужское бесплодие и увеличило актуальность проведения ПГС у этих пар.

При мужском бесплодии чаще обнаруживаются различные генетические дефекты.

Они включают в себя анеуплоидии, чаще всего синдром Клайнфельтера, робертсоновские транслокаций, микроделеции Y-хромосомы, мутации рецептора к андрогенам, а также другие мутации (например, муковисцидоз, мутации трансмембранного гена-регулятора проводимости и гена глобулина, связывающего половые гормоны). Таким образом, высокий риск передачи генетических мутаций потомству пациента возникает в случаях необходимости проведения ЭКО с применением ИКСИ.

И все же делать ПГС, если нет «обычных» показаний, или не делать? Есть другие основания для ПГС?

В августе 2016 года было опубликовано исследование, сравнивающее две стратегии:

1. Проведение преимплантационного скрининга всем бластоцистам с последующим переносом эмбрионов с известным, нормальным кариотипом.
2. Перенос эмбрионов на стадии бластоцисты, но без проведения преимплантационного скрининга.

Первая группа (с ПГС)	Вторая группа (без ПГС)
Возраст	Количество циклов ЭКО	Количество переносов	Роды	Рождение ребенка /начатый цикл ЭКО	Количество циклов ЭКО	Количество переносов	Роды
≤34	46	43	35	76.1 %	46.2 %	65	64	30
35–37	43	41	30	69.8 %	48.6 %	35	32	17
38–40	47	37	30	63.8 %	27.8 %	36	35	10
41–42	28	12	8	28.6 %	6.3 %	16	15	1
43+	8	1	1	12.5 %	0.0 %	8	7	0

Во всех возрастных группах наблюдается значимая разница по результативности. Но особенно в возрасте 38 и старше. Результативность на начатую программу ЭКО увеличивается в 2 и более раз.

Заключение:

Преимплантационная диагностика переросла в преимплантационный генетический скрининг (ПГС). По мере развития технологии ПГС из групп риска (те у кого выше вероятность эмбрионов с ненормальным кариотипом) начал давать положительный эффект в общей группе пациентов, обращающихся за лечением бесплодия с помощью ЭКО.

Исключение эмбрионов с отклонениями в кариотипе позволяет:

• быстрее добиться беременности,
• избежать выкидышей, связанных с анеуплоидией (бОльшая часть выкидышей),
• исключить рождение детей с хромосомными аномалиями, например, с синдромом Дауна,
• увеличить вероятность рождения ребенка на начатую программу ЭКО.

Чтобы все это получить важны:

• Оценка ВСЕХ хромосом (любой метод),
• Биопсия трофоэктодермы на стадии бластоцисты,
• Высокий профессионализм эмбриолога:
  • умение делать бережную и аккуратную биопсию
    • если взять слишком мало клеток для биопсии — анализ будет недостоверный, если слишком много – эмбрион может этого и не пережить
  • умение выполнять криоконсервацию эмбрионов без потерь
    • в таких лабораториях эффективность криопереносов выше, чем свежих

Источник: http://doctorvladimirov.ru/eko-predimplantatsionnaya-geneticheskaya-diagnostika-pgd-ili-predimplantatsionnyiy-geneticheskiy-skrining-pgs/

Пгт и пгс

Что такое анеуплоидия?

Специальные структуры в клетках организма, несущие генетическую информацию, называют хромосомами. В норме их должно быть 46 (23 пары). От матери и от отца наследуется по одной копии.

Если эмбрион обладает правильным набором хромосом, его называют эуплоидным. Когда число этих структур изменено, идет речь об анеуплоидии. Такая аномалия становится возможной, если у сперматозоида или ооцита присутствуют избыточные или отсутствуют необходимые хромосомы.

Одним из наиболее распространенных примеров анеуплоидии является синдром Дауна, характеризующийся наличием лишней хромосомы в 21-й паре.

Каковы преимущества преимплантационного генетического тестирования на анеуплоидии (ПГТ-А)?

В настоящее время ПГТ-А является единственным исследованием, способным до переноса эмбриона в полость матки определить, содержит ли он нормальное количество хромосом.

ПГТ-А уменьшает вероятность неудачной имплантации, раннего выкидыша и рождения ребенка с хромосомной патологией, а также повышает шансы на здоровую беременность.

Как выполняется ПГТ-А?

ПГТ-А предполагает исследование нескольких клеток эмбриона, находящегося на стадии бластоцисты (5-6 день развития).

Во избежание ложных результатов тестирования, биопсия бластоцисты осуществляется при ее определенных размерах и хороших морфологических показателях.

Если предполагается проведение ПГТ-А, предпочтителен метод оплодотворения ИКСИ. Это необходимо для того, чтобы избежать попадания ДНК сперматозоидов в образец биопсии.

ПГТ-А может выполняться двумя возможными способами лабораторной диагностики:

• Массивное параллельное секвенирование (NGS)

Массивное параллельное секвенирование нового поколения (next generation sequencing) — это современная технология, которая позволяет проанализировать все 23 пары хромосом, включая половые.

NGS используется прежде всего для определения лишних или отсутствующих копий, небольших дупликаций (удвоение какого-либо участка) или делеций (утрата участка) хромосом. Данный метод обладает самой высокой разрешающей способностью и чувствительностью по определению низкоуровневого мозаицизма.

• Сравнительная геномная гибридизация на чипах (aCGH)

Сравнительная геномная гибридизация (comparative genome hybridization) — это технология, которая также дает возможность осуществить анализ всех 23 пар хромосом.

При выполнении arrayCGH ДНК клеток эмбрионов сравнивается с нормальным контрольным образцом.

Как и NGS, данный метод используется для определения лишних или отсутствующих копий целых хромосом, а также в некоторых случаях позволяет выявить небольшие дупликации или делеции.

Метод сравнительной геномной гибридизации обладает высокой разрешающей способностью и меньшей чувствительностью по выявлению низкоуровневого мозаицизма.

Нужна консультация специалиста?

ПГТ для моногенных заболеваний

Что такое моногенные заболевания?

Моногенными называют заболевания, обусловленные мутациями в одном из генов. Многие из них являются наследственными, и риск передачи патологии ребенку составляет 25-50%. К наиболее распространенным моногенным заболеваниям относятся муковисцидоз, мышечная дистрофия Дюшенна и серповидноклеточная анемия.

Что такое ПГТ-М на моногенные заболевания?

Исследование позволяет выявить эмбрионы, которые несут моногенное заболевание. ПГТ на моногенные заболевания рекомендуется семейным парам с высоким риском передачи патологии ребенку по результатам медико-генетической консультации. Этот метод позволяет исследовать любой из генов, если известна мутация.

Как проводится ПГТ-М на моногенные заболевания?

Исследование 4-5 клеток эмбриона, полученных в результате биопсии, заметно отличается от генетического тестирования ребенка или взрослого человека.

Из-за ограниченного количества ДНК в клетках для каждой супружеской пары до вступления в программу ЭКО разрабатывается индивидуальная система тестирования.

Для проведения предварительного этапа ПГТ-М требуется образец ДНК от каждого партнера и членов семьи (родителей супругов).

Биопсия эмбрионов, как мы уже говорили выше, проводится на 5-6 день их развития. Полученные клетки анализируют с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Оплодотворение осуществляется путем введения сперматозоида непосредственно в цитоплазму ооцита (ИКСИ), чтобы исключить попадание ДНК мужских половых клеток в образец биопсии.

Точность ПГТ-М на моногенные заболевания составляет высокая, но не достигает 100%. Как правило, для повышения вероятности имплантации и наступления беременности дополнительно проводится ПГТ-А на 46 хромосом.

ПГТ на транслокации и хромосомные перестройки

Что такое транслокации / хромосомные перестройки?

Типы хромосомных перестроек:

• транслокации: обмен участками между двумя хромосомами;
• инверсии: участок хромосомы имеет обратную ориентацию;
• делеция: отсутствует участок хромосомы;
• дупликация: есть дополнительный участок хромосомы;
• инсерция:вставка участка одной хромосомы в другую.

При сбалансированной транслокации или инверсии генетическая информация остается верной, но участки хромосомы находятся в другом положении, чем обычно. В таких случаях люди обычно здоровы, но подвержены повышенному риску бесплодия, прерывания беременности и/или рождения ребенка с хромосомной аномалией.

Как проводится ПГТ на хромосомные перестройки?

В качестве материала для этого исследования также используют клетки эмбрионов на стадии бластоцисты. Предоставления образцов родительской крови или проведения предварительного этапа обычно не требуется, но окончательное решение по этому вопросу принимает врач-генетик.

ПГТ на хромосомные перестройки может выполняться методами NGS или aCGH.

Можно ли отличить эмбрионы со сбалансированной транслокацией от тех, у которых ее нет вообще? К сожалению, нет. Основная задача ПГТ — выявление только несбалансированных вариантов перестроек, которые будут сопровождаться комплексом врожденных пороков развития и умственной отсталостью ребенка.

После проведения любого из перечисленных исследований потребуется консультация врача-генетика, который разъяснит полученные результаты и выберет эмбрионы для переноса.

Нужна консультация специалиста?

Вернуться к списку

Источник: https://nova-clinic.ru/statyi/pgd-i-pgs/

Преимплантационный генетический скрининг

в соц. сетях:

21-11-2017

Одной из главных причин неудачных попыток ЭКО, самопроизвольного прерывания последующей беременности и рождения больных детей сегодня считается наличие хромосомных аномалий у плода.

Избежать перечисленных рисков при ЭКО помогает преимплантационный генетический скрининг (ПГС), благодаря которому нарушения обнаруживаются еще на стадии получения эмбрионов, до их переноса в полость матки. Таким образом, для переноса используются только здоровые эмбрионы, благодаря чему многократно увеличиваются шансы на успешную беременность и рождение здорового малыша.

Хромосомные аномалии эмбрионов приводят к невынашиванию беременности

Когда необходимо проведение ПГС

Преимплантационный генетический скрининг не является обязательной процедурой и не входит в стоимость программы ЭКО, но в настоящее время специалисты все больше сходятся во мнении, что ПГС необходим как минимум в половине случаев ЭКО.

На сегодняшний день показаниями к обязательному проведению ПГС являются:

• Возраст женщины старше 35 лет: если у молодых пациенток количество генетически здоровых эмбрионов в среднем составляет почти 80 % от общего количества, то к 40 годам оно снижается до 20 %, а к 44 – 4–5 %.
• Бесплодие неясного генеза.
• Две и более неудачных попытки ЭКО.
• Наличие более двух самопроизвольно прервавшихся, в том числе замерших беременностей.
• Плохие показатели качества спермы мужчины.

Также ПГС оправдан при измененном кариотипе родителей, когда велик риск передачи наследственных патологий. В этом случае может быть показана и преимплантационная генетическая диагностика.

Виды хромосомных нарушений и их последствия

Хромосомные аномалии эмбрионов носят название анеуплоидии. В норме у каждого человека имеется диплоидный или двойной набор хромосом в соматических клетках, который состоит из 22 пар аутосом и 2 половых хромосом. В половых клетках содержится гаплоидный или одинарный набор хромосом, который в момент оплодотворения становится диплоидным.

Отсутствие одной хромосомы в любой хромосомной паре (моносомия) в большинстве случаев вызывает невозможность имплантации эмбриона или же приводит к внутриутробному развитию пороков, не совместимых с жизнью. При нехватке Х-хромосомы развивается синдром Шерешевского-Тернера, который проявляется аномалиями физического развития.

Второй тип анеуплоидии – увеличение хромосомного набора на одну (трисомия), две (тетрасомия) или три (пентасомия) хромосомы. В большинстве случаев патология также несовместима с жизнью, но в ряде случаев приводит к нарушениям у плода.

В частности, вызывает синдром Патау – тяжелые поражения мозга и внутренних органов, синдром Эдвардса – недоразвитие скелетной мускулатуры, деформации стоп и кистей, нарушения развития ЦНС и внутренних органов.

90–95 % случаев возникновения данных состояний приводят к гибели детей на первом году жизни. Наличие дополнительной Х-хромосомы у мальчиков вызывает синдром Кляйнфельтера с наличием разной степени выраженности умственной и физической отсталости, а также нарушениями полового развития.

Одна из наиболее часто встречающихся патологий – синдром Дауна, который проявляется в умственной и физической отсталости.

Преимущества преимплантационного генетического скрининга

Основное преимущество ПГС заключается в возможности отслеживания хромосомных нарушений у эмбриона еще до его переноса в матку, то есть до фактического наступления беременности. Другие методы диагностики, такие как пренатальный скрининг, позволяют обнаружить патологию только по факту, поэтому единственной мерой становится прерывание беременности.

Проведение ПГС в ряде случаев может ускорить наступление беременности методом ЭКО

Использование ПГС в рамках проведения ЭКО повышает шансы на успешную беременность особенно у женщин в возрасте после 40 лет: вероятность успеха в этом случае практически такая же, как у молодой женщины. Главное – получить эмбрион с нормальным кариотипом.

Довольно часто встречаются случаи, когда получить генетически здоровые эмбрионы не удается. Плюс ПГС опять же в том, что увидеть это можно заранее и принять решение о дальнейших действиях: использовании донорских яйцеклеток или же отказ от ЭКО в пользу усыновления.

В настоящее время процедура ПГС хорошо знакома специалистам клиники «ЭКО на Петровке», которые имеют большой опыт в проведении данного исследования. Скрининг проводится путем биопсии, то есть забора нескольких клеток эмбриона на 5–6-е сутки его жизни. Данный метод является малотравматичным и полностью безопасным для эмбриона.

Источник: https://proivf.ru/blog/preimplantatsionnyy-geneticheskiy-skrining/

Пгд при эко: основные методы и цена

В ситуациях, когда существует вероятность передачи ребенку наследственных генетических патологий, семейной паре, желающей завести малыша, назначают предимплантационную генетическую диагностику (сокращенно — ПГД, она же PGD).

При экстракорпоральном оплодотворении эта процедура становится еще более важной, ведь супругам придется пройти долгий путь лечения. ПГД при ЭКО способна выявить до 150 хромосомных аномалий еще до переноса эмбрионов в полость матки.

Это позволяет свести риск рождения ребенка с генетическим заболеванием к минимуму.

Исследование генов обоих родителей при ЭКО очень важно, иногда просто необходимо.

Общие сведения о ПГД

Предимплантационная генетическая диагностика является современным методом, позволяющим своевременно выявить хромосомные и генные аномалии у эмбриона, еще до его процедуры внедрения в матку. Проводится данная процедура обычно по рекомендации врача, но семейная пара сама может изъявить желание в рамках цикла экстракорпорального оплодотворения.

ПГД при ЭКО повышает эффективность протокола до 70%.

Изучение хромосомного набора оплодотворенной яйцеклетки происходит в лаборатории. Поскольку исследование проводят на начальной стадии развития эмбриона, травмировать его практически невозможно.

Изучают оплодотворенные яйцеклетки одновременно с основным лечением, назначенным пациентке.

Для проведения ПГД необходимо большее количество фолликулов, поэтому стимулируются яичники с помощью гормональной терапии интенсивнее.

Опасность для ребенка представляют не все хромосомные аномалии, выявленные у родителей, а их комбинаций с характерными признаками. Именно такие гены являются угрожающими факторами, влияющими на возможное развитие патологий у малыша.

Посмотрите запись интересной передачи о ПГД:

Типы признаков мутации

Существует два типа признаков мутации: доминантный и рецессивный. Когда малышу передается первый мутационный вид, то риск развития патологии увеличивается на 50%. Например, если оба родителя «носят» рецессивный признак, проявление генетической аномалии возможно при получении малышом «больных» генов и мужчины, и женщины.

Будет ли рожден ребенок с патологией, также зависит и от пола эмбриона. Поскольку 23-я пара хромосом у женщин представляется в виде ХХ, а у мужчин — ХY, то в случае, если больна одна из женских хромосом, аномалия малышу не передастся. Вторая хромосома воспрепятствует передаче «больного» гена.  При этом ребенок будет также носителем «неисправной» хромосомы.

К сожалению, мужчины не обладают таким защитным механизмом в организме. Рожденные от носителей «дефектной» хромосомы девочки тоже будут ее обладательницами, а мальчики появятся на свет с возможной генетической патологией.

Разница между ПГД и ПГС при ЭКО

Предимплантационная генетическая диагностика позволяет узнать сразу, какая определенная комбинация была унаследована зародышем.

Благодаря ПГД будущие мама и папа будут знать, появится ли малыш с генетической аномалией, либо будет носить хромосомный дефект. В лаборатории исследуют все эмбрионы для подсадки.

После проведения исследования выбираются самые «чистые» оплодотворенные яйцеклетки.

Некоторые путают предимплантационную генетическую диагностику со скринингом. На самом деле это совершенно разные процедуры. Задача ПГД — минимизация риска появления на свет малыша с проблемами в генетическом плане.

У ПГС (предимплантационный генетический скрининг) — главная задача увеличение шансов на беременность.

Генетическая диагностика исследует эмбрионов на предмет генетических аномалий, генетический скрининг, по сути, является отбором самых здоровых зародышей для успешного оплодотворения.

Еще одно интересное видео, теперь о скрининге (ПГС):

ПГД при ЭКО назначают для:

1. Страховки от трансфера эмбрионов с «неисправными» хромосомами.
2. Выявления проблемы, послужившей катализатором срыва предыдущего протокола.
3. Снижения риска рождения малыша с патологией.
4. Определения пола будущего малыша, чтобы избежать генетических аномалий по гендерному признаку.
5. Выявления зародышей, имеющих предрасположенность к генетическим заболеваниям.
6. «Нахождения» эмбриона, наиболее совместимого по HLA-системе с другими детьми семьи для донорства при их лечении.
7. Снижения риска прерывания беременности на раннем сроке.
8. Минимизации риска проявления гемолитических заболеваний у ребенка.
9. Выбора «идеального» эмбриона для подсадки, исключив при этом многоплодную беременность.

ПГД позволит выявить и исключить множество опасных для ребенка патологий. К примеру, болезнь Гоше, синдром Дауна, глухонемоту, поликистоз почек. Всего, предимплантационная генетическая диагностика, способна выявить более 150 видов генетических заболеваний.

Однако, не всегда исследование является залогом рождения здорового ребенка. Отмечены случаи ложноотрицательных результатов, поскольку некоторые методы исследования выявляют только определенное количество хромосом,  а неучтенные оказываются именно «неисправными».

Еще один вариант, когда ПГД является неинформативной — мозаичное развитие аномалий. Во время диагностики клетка выглядит здоровой, но в процессе развития мутирует.

Когда нужно делать ПГД

Пройти предимплантационную генетическую диагностику предлагают не каждой паре, решившей сделать ЭКО. Существует ряд показаний, при которых эта процедура рекомендована.

А именно:

• У супругов есть «дефектные» хромосомы, имеются моногенные аномалии либо выявлена хромосомная перестройка.
• Возрастная пара (женщина старше 35 лет, мужчина — после 40 лет). Чем взрослее пара, тем вероятнее рождение малыша с генными аномалиями, даже если у супругов не наблюдаются «неисправные» хромосомы.
• Предыдущие беременности заканчивались смертью новорожденных из-за резус-конфликта.
• Исследование яйцеклеток и сперматозоидов выявило наличие дефектных ген и хромосом.
• Неудовлетворительный результат спермограммы. Выявлены серьезные нарушения, такие как азооспермия или олигозооспермия.
• В предыдущих протоколах ЭКО беременность не наступала.
• Беременность прерывалась на ранней стадии развития эмбриона.

Чем старше пара, тем с большей необходимостью нужно делать ПГД.

Поскольку список генетических заболеваний довольно внушительный, диагностику при ЭКО рекомендовано проводить всем пациенткам старше 35 лет. Возрастные изменения нередко грозят неприятными «неожиданностями» во время беременности, даже если зачатие произошло естественным путем.

Ускоренное старение женского организма и ПГД

Существуют ситуации, при которых женский организм «стареет» гораздо быстрее в биологическом смысле. Ускоренному старению женского организма способствуют определенные факторы. Вот некоторые из них:

• длительный прием сильнодействующих лекарственных средств;
• нездоровый образ в жизни в прошлом (курение, алкоголизм, наркомания);
• хронические заболевания;
• вредные условия работы;
• плохая экологическая обстановка.

ПГД также необходима, если:

• Необходимо получение определенных стволовых клеток для лечения других детей в семье.
• Мужчина и женщина являются близкими родственниками.
• Супруги получили долю радиационного облучения.

Стоимость протокола ЭКО с ПГД значительно выше, чем без процедуры, поэтому решение о проведении диагностики принимается пациенткой самостоятельно. Необходимо учитывать, что всего в 20-40%  случаев подсадка эмбриона заканчивается беременностью (в зависимости от возраста пациентки).

ПГД позволяет не только выявить генные мутации у зародыша, но и повысить вероятность успешной подсадки (до 70%, в зависимости от возраста).

Эмбрионы, полученные при ЭКО у женщин старше 40 лет, на 50% чаще имеют аномальные гены, чем у более молодых пациенток.

Как делают ПГД при ЭКО

Все начинается с подготовки. Подготовка к диагностике представляет собой консультацию и обследование супругов, у которых имеются показания к ПГД. Врач расскажет о преимуществах и недостатках процедуры.

Поскольку для исследования потребуется большое количество зрелых яйцеклеток, то стимуляция в протоколе будет интенсивнее, что может послужить возникновению синдрома гиперстимуляции.

После обследования пары приступают непосредственно к самой диагностике.

Процедура делится на 8 этапов:

1. Яйцеклетки извлекаются и оплодотворяются в лаборатории.
2. Клетка развивается в течение 3-5 дней.
3. Лаборантами отбираются самые жизнеспособные оплодотворенные яйцеклетки.
4. Проводится биопсия. У зародыша извлекают клетки для анализа.
5. Фиксируется бластомер.
6. Проводится гибридизация.
7. Формируется биоинформационный анализ. Полученные данные расшифровываются.
8. Генетик проводит МГК (медико-генетическое консультирование пациента).

ПГД никоим образом не влияет на развитие органов и тканей будущего малыша, поэтому на здоровье эмбриона диагностика не отражается.

После ПГД генетик отбирает «чистые» эмбрионы — они будут пригодны для трансфера. Зародыши с дефектными хромосомами пациентке не подсаживаются.

Какие существуют методы ПГД

Предимплантационная генетическая диагностика выполняется 4 методами: FISH, CGH, PCR, NGS. Каждый из них имеет свою специфику, свои плюсы и минусы. Одни способы дороже, другие дешевле. Чем дороже метод — тем он точнее.

ПГД по технологии FISH

По-другому он называется молекулярно-цитогенетическим методом (англ. Fluorescent In Situ Hybridization). Этот вариант диагностики является самым бюджетным и широко применяется на всем постсоветском пространстве. Однако, главный минус этого метода — неточность, ведь исследованию подвергаются не все хромосомы, а лишь определенное их количество.

Методом FISH  специалист за 5 часов определяет последовательность хромосом у эмбриона, пол зародыша, и получит ответ на вопрос, имеются ли у будущего малыша распространенные генетические аномалии или нет.

Метод CGH

Другое название процедуры — сравнительная геномная гибридизация. Такое исследование проводится значительно дольше, чем предыдущее. Стоимость его тоже выше. Однако, метод CGH имеет множество плюсов.

Благодаря этому исследованию можно:

• отобрать самые жизнеспособные эмбрионы, которые оптимальны для подсадки пациентке;
• снизить вероятность постановки неверного диагноза, так как при помощи этого метода проверяется большое количество стволовых клеток;
• исследовать замороженных зародышей, которые будут использоваться в криопротоколе.

Сравнительная геномная гибридизация проводится с использованием специального чипа. Сканирование и обработка результатов проводится компьютерной программой, что сводит к минимуму человеческий фактор.

ПГД методом PCR

Перед исследованием эмбрионов методом ПЦР (полимеразной цепной реакцией) обязательно проводится диагностика супругов на наличие генных аномалий. Это необходимо для исключения ошибок при постановке диагноза заболевания, возникающего из-за мутации клеток.

Задачи полимерной цепной реакции — отыскать изъяны в работе хромосом и выявить моногенные патологии. Метод вычисляет наличие антител несовместимости у супругов и резус-фактор эмбрионов.

Если для процедуры ЭКО берется донорская яйцеклетка, исследования методом ПЦР не проводятся.

Метод NGS

Самым современным диагностическим методом является высокопроизводительное секвенирование. NGS это аббревиатура (от англ.

Next Generation Sequencing) и переводится дословно, как «последовательность следующего поколения». Это исследование самое дорогостоящее и эффективное, позволяющее изучить все 23 пары хромосом.

Технология позволяет установить исходную нуклеотидную последовательность нужного блока ДНК или целого генома человека.

Существует 5 вариантов данного метода: пиросеквенирование, секвенирование на молекулярных кластерах, техническое лигазное секвенирование, ионное полупроводниковое секвенирование и одномолекулярное секвенирование. Каждый из них имеет свои особенности.

Сколько стоит ПГД

Экстракорпоральное оплодотворение требует немалых затрат, в том числе и денежных. ПГД увеличивает его стоимость в разы, поскольку используется дорогостоящие оборудование и материалы. Однозначно ответить на вопрос о стоимости генетической диагностики невозможно.

Цена анализа зависит от ряда факторов. Чем исследование шире и точнее, тем дороже.

На стоимость ПГД влияет:

1. Выбранный метод исследования.
2. Количество зародышей, которые нужно изучить.
3. Проведение вспомогательных тестов.
4. Изучение изменений генетического строения хромосом.

На цену диагностики также влияет количество исследуемых аномалий. Например, в Москве средняя стоимость исследования одного эмбриона колеблется от 20 до 30 тысяч рублей. Цена комплексного изучения иногда достигает 250 тысяч рублей. В среднем комплексная проверка обоих родителей стоит 150 тысяч рублей. Цена в регионах немного ниже, но не существенно.

Источник: https://ekobesplodie.ru/eko/pgd