ПЦР и ифа к вэб

Вирус Эпштейна-Барр, ДНК (EBV, ПЦР) плазма, кач

Вирус Эпштейна-Барра

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет увеличить число копий ДНК бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК.

Синтезированное количество ДНК идентифицируют методами иммуноферментного анализа или электрофореза.

ПЦР-диагностика позволяет обнаружить возбудителя на самых ранних этапах инфекционного процесса, в любой биологической среде организма, с возможностью количественного определения вирусов или бактерий.

Вирус Эпштейна-Барра вызывает инфекционный мононуклеоз. Инфекционный мононуклеоз (железистая лихорадка Филатова-Пфейффера, моноцитарная ангина, доброкачественный острый лимфобластоз) – острое вирусное заболевание, вызываемое 4 типом вируса простого герпеса вирусом Эпштейна-Барра.

Заболевание характеризуется интоксикацией, поражением небных и глоточных миндалин, увеличением лимфатических узлов, печени и селезенки, а также изменениями в крови (наличием атипичных мононуклеаров). Источник инфекции – больной и вирусоносители. Пути передачи: контактный (через посуду, предметы личной гигиены) и воздушно-капельный.

Инкубационный период составляет от нескольких дней до 2 месяцев, первые симптомы – умеренные признаки интоксикации и лихорадка. Вирус способствует развитию опухолей, например, лимфомы Беркитта, карциномы носоглотки.

Учитывая неспецифичность признаков инфекционного заболевания нужно проводить дифференциальную диагностику с такими заболеваниями, как лакунарная ангина, аденовирусная инфекция, дифтерия. Материалом для исследования методом ПЦР могут служить мазок из зева и миндалин.

Обращаем Ваше внимание, что взятие урогенитального мазка, мазка из зева, носа, полости рта — платное.

Вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) — представитель ДНК-содержащих вирусов из семейства Herpesviridae, являющийся вирусом герпеса человека 4-го типа.

В настоящее время доказано, что ВЭБ вызывает инфекционный мононуклеоз, а также способствует развитию опухолей, таких как назофарингеальная карцинома, лимфома Беркитта, Т-клеточная лимфома, болезнь Ходжкина. Около 90% людей старше 40 лет инфицированы ВЭБ.

  Учитывая неспецифичность признаков инфекционного заболевания нужно проводить дифференциальную диагностику с такими заболеваниями, как лакунарная ангина, аденовирусная инфекция, дифтерия.  Вирус выделяется со слюной в остром периоде заболевания и в течение 6-ти месяцев после выздоровления.

Инфекционный мононуклеоз — это острая вирусная патология, которая характеризуется лихорадкой, поражением ротоглотки, увеличением лимфатических узлов, печени и селезенки. У 10-18% больных появляется пятнисто-папулёзная сыпь, возникновению которой предшествует приём препаратов ампициллина или амоксициллина.

Инкубационный период — от 4-х до 7-ми недель. Острые симптомы могут сохраняться в течение 3-4-х недель. Реже возможно развитие затяжного (3-6 месяцев) или хронического (более 6-ти месяцев) инфекционного процесса.

Вирус определяется с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР), которая позволяет увеличить число копий ДНК бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК. Синтезированное количество ДНК идентифицируют методами иммуноферментного анализа или электрофореза.

ПЦР-диагностика позволяет обнаружить возбудителя на самых ранних этапах инфекционного процесса, в любой биологической среде организма, с возможностью количественного определения вирусов или бактерий.

Показания к назначению исследования

1. Для диагностики инфекционного мононуклеоза.
2. Для дифференциальной диагностики герпетических инфекций.
3. Для дифференциальной диагностики при ангинах и тонзиллитах.
4. Для выявления реактивации вируса Эпштейна – Барр при трансплантации органов и тканей.

За 2 недели исключить прием противовирусной терапии Исключить прием антисептических препаратов за 5-7 дней до исследования. Не принимать пищу в течение 4 часов перед сдачей анализа, можно пить чистую негазированную воду.

Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования, обязательных требований нет.

Факторы, влияющие на результаты исследований

1. Предшествующая противовирусная терапия.
2. Загрязнение пробы посторонними молекулами ДНК может приводить к ложноположительному результату.

Результат «обнаружено» – означает наличие вируса Эпштейна-Барр. 
Результат «не обнаружено» — следует интерпретировать как отсутствие в образце специфических участков ДНК вируса Эпштейна-Барр.

Синонимы русские

Вирус инфекционного мононуклеоза, Вирус Эпштейна-Барр, Герпес 4 типа, Герпесвирус 4 типа,ГВЧ-4

Синонимы английские

EBV, Human gammaherpesvirus 4, Human herpesvirus 4

Другие анализы раздела

ПЦР-диагностика

Наименование анализов Код по бланку: Срок исполнения: Цена в руб.

Вирус простого герпеса 1,2 (мазок) (кач.)	19.23.2.	1 день
Вирус простого герпеса 1,2 (мазок) (колич.)	19.67.2.	1 день
Вирус Эпштейна-Барр, ДНК (EBV, ПЦР) соскоб, кач.	19.35.2.	1 день
Вирус Эпштейна-Барр, ДНК (EBV, ПЦР) соскоб, кол.	19.71.2.	1 день
ВПЧ 16/18 типа, ДНК (HPV, ПЦР, определение генотипа) соскоб, кач.	19.92.1.	1 день
ВПЧ 16/18 типа, ДНК (HPV, ПЦР, определение генотипа) соскоб, кол.	19.93.1.	1 день

Источник: https://www.gemotest.ru/catalog/po-laboratornym-napravleniyam/diagnostika-infektsiy/ptsr-diagnostika/individualnaya-diagnostika-vozbuditeley/virus-epshteyna-barr-virus-gerpesa-4-tipa/virus-epshteyna-barr-virus-gerpesa-4-tipa-kachestvennyy-analiz/virus-epshteyna-barr-krov-kach-/

Вирус Эпштейна-Барр: симптомы инфекции, диагностика и лечение ВЭБ

Вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) – причина хронической персистирующей инфекции из группы герпесвирусных возбудителей (вирус герпеса 4-го типа).

Источником заражения ВЭБ является больной человек или вирусоноситель.

Передача вируса может происходить воздушно-капельным, половым и контактно-бытовым путем через слюну, мокроту, влагалищные и уретральные выделения, кровь. По имеющимся данным около 80% населения инфицированы ВЭБ.

Заболевания, вызванные ВЭБ

Эпштейна-Барр вирусная инфекция, как правило, встречается у детей и молодых людей. Однако могут наблюдаться в любом возрасте. Клинические проявления инфекции крайне разнообразны и отличаются пестрой симптоматикой, что значительно затрудняет диагностику.

Как правило, проявления ВЭБ развиваются на фоне снижения иммунитета, что свойственно всем герпесвирусным инфекциям. Первичные формы заболевания и его рецидивы всегда связаны с врожденным или приобретенным иммунодефицитом.

У людей с выраженным иммунодефицитом наблюдаются генерализованные формы инфекции с поражением центральной нервной системы, печени, легких и почек. Нередко тяжелые формы инфекции ВЭБ, могут ассоциироваться с ВИЧ-инфекцией.

Внимание!

В настоящее время установлено, что ВЭБ также ассоциирован с целым рядом онкологических, преимущественно лимфопролиферативных и аутоиммунных заболеваний (классические ревматические болезни, васкулиты, неспецифический язвенный колит и др.). Кроме того, ВЭБ вызывает манифестные и стертые формы заболевания, протекающие по типу острого и хронического мононуклеоза.

Течение ВЭБ-инфекции

У людей с нормальным иммунитетом после заражения ВЭБ возможны два варианта. Инфекция может протекать бессимптомно либо проявляться в виде незначительных признаков, напоминающих грипп или острое  респираторное вирусное заболевание (ОРВИ). Однако в случае заражения на фоне уже имеющегося иммунодефицита у пациента может развиться картина инфекционного мононуклеоза.

В случае развития острого инфекционного процесса возможны несколько вариантов исхода заболевания:– выздоровление (ДНК вируса можно выявить только при специальном исследовании в единичных В-лимфоцитах или эпителиальных клетках);– бессимптомное вирусоносительство или латентная инфекция (вирус определяется в слюне или лимфоцитах лабораторно);– развитие хронического рецидивирующего процесса:а) хроническая активная ВЭБ-инфекция по типу хронического инфекционного мононуклеоза;б) генерализованная форма хронической активной ВЭБ-инфекции с поражением ЦНС, миокарда, почек и др.;в) стертые или атипичные формы ВЭБ-инфекции: длительный субфебрилитет неясного генеза, рецидивирующие бактериальные, грибковые, часто микст-инфекции респираторного и желудочно-кишечного тракта, фурункулез;г) развитие онкологических  заболеваний (лимфома Беркитта, назофарингеальная карцинома и др.);д) развитие аутоиммунных заболеваний;

е) ВЭБ-ассоциированный синдром хронической усталости.

Исход острой инфекции, вызванной ВЭБ, зависит от наличия и степени выраженности иммунного дефицита, а также от наличия ряда внешних факторов (стрессы, сопутствующие инфекции, операционные вмешательства, гиперинсоляция, переохлаждения и др.), способных нарушать работу иммунной системы.

Клинические  проявления ВЭБ-инфекции

Клинические проявления заболеваний, вызванных ВЭБ, во многом зависят от остроты процесса. Также имеет значение первичность инфекционного процесса или возникновение клинической симптоматики хронической инфекции. В случае развития острого инфекционного процесса при заражении ВЭБ наблюдается картина инфекционного мононуклеоза. Он, как правило, возникает у детей и молодых людей.

Развитие данного заболевания приводит к появлению следующих клинических признаков: – повышение температуры,– увеличение различных групп лимфоузлов,– поражение миндалин и гиперемии зева.

Достаточно часто наблюдается отечность лица и шеи, а также увеличение печени и селезенки.

В случае развития хронически активной ВЭБ-инфекция наблюдается длительное рецидивирующее течение заболевания.

Пациентов беспокоят: слабость, потливость, нередко боли в мышцах и суставах, наличие  различных кожных высыпаний, кашель, дискомфорт в горле, боли и тяжесть в правом подреберье, головные боли, головокружение, эмоциональная лабильность, депрессивные расстройства, нарушение сна, снижение памяти, внимания, интеллекта. Часто наблюдаются субфебрильная температура, увеличение лимфоузлов и гепатоспленомегалия различной степени выраженности. Обычно эта симптоматика имеет волнообразный характер.

У пациентов с выраженной иммунной недостаточностью возможно возникновение генерализованных форм ВЭБ-инфекции с поражением центральной и периферической нервной систем (развитие менингита, энцефалита, мозжечковой атаксии, полирадикулоневритов), а также с поражением других внутренних органов (развитие миокардита, гломерулонефрита, лимфоцитарного интерстициального пневмонита, тяжелых форм гепатита). Генерализованные формы ВЭБ-инфекции могут  привести к летальному исходу.

Достаточно часто хроническая ВЭБ инфекция протекает стерто или может напоминать другие хронические заболевания.

При стертых формах инфекции пациента может беспокоить волнообразно возникающие субфебрильная температура, боли в мышцах и лимфоузлах, слабость, нарушение сна.

В случае течения инфекционного процесса под маской другого заболевания наиболее важными признаками являются: длительность симптоматики и устойчивость к терапии.

Лабораторные исследования

Учитывая то, что клинически диагноз «ВЭБ-инфекция» выставить невозможно, ведущим в определении заболевания являются методы лабораторной диагностики.

Их можно разделить на две группы скрининговые и уточняющие:

1. К скрининговым можно отнести те, которые наряду с клинической  симптоматикой позволяют заподозрить ВЭБ-инфекцию. В клиническом анализе крови: могут наблюдаться: незначительный лейкоцитоз, лимфомоноцитоз, возможно, тромбоцитопения.

В биохимическом анализе крови выявляются: повышение уровня трансаминаз  и других ферментов, белков острой фазы – С-реактивный белок, фибриноген и др.

Однако эти изменения не являются строго специфичными для ВЭБ-инфекции (их можно обнаружить и при других вирусных инфекциях).

2. Важным исследованием, позволяющим установить наличие возбудителя в организме, является серологическое обследование: повышение титров антител к ВЭБ, является критерием наличия инфекционного процесса в настоящее время или свидетельством контакта с инфекцией в прошлом. Однако наличие антител не позволяет однозначно говорить о том, что клинические проявления заболевания вызваны ВЭБ.

3. Для получения наиболее достоверных результатов используется ДНК-диагностика. С помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) определение ДНК ВЭБ проводят в различных биологических материалах: слюне, сыворотке крови, лейкоцитах и лимфоцитах периферической крови.

При необходимости проводят исследование в биоптатах печени, лимфоузлов, слизистой кишечника и т. д.

Таким образом, для постановки диагноза ВЭБ-инфекции, помимо проведения общеклинических обследований, необходимы серологические исследования (ИФА) и ДНК диагностика инфекции в различных материалах в динамике.

Лечение ВЭБ-инфекции

В настоящее время общепринятых схем лечения ВЭБ-инфекции не существует. Объем терапии больных, как с острой, так и с хронической активной ВЭБ-инфекцией может быть различным, в зависимости от длительности заболевания, тяжести состояния и иммунных расстройств.

В комплексном лечении данного заболевания используются различные группы препаратов, в том числе рекомбинантные интерфероны, которые подавляют размножение вируса, защищают незараженные клетки, укрепляют иммунитет.

Кроме того, применяются ациклические синтетические нуклеозиды и другие противовирусные препараты, обеспечивающие остновку репликации вируса в пораженных клетках, а также глюкокортикоиды, действие которых направлено на купирование воспалительных процессов в органах и тканях.

В зависимости от выраженности тех или иных симптомов заболевания назначается различная симптоматическая терапия (анальгетики, антиоксиданты, нестероидные противовоспалительные средства, муколитики и др.).

Интерферон в лечении болезни

Препаратом выбора при лечении ВЭБ-инфекции может стать интерферон-альфа, в среднетяжелых случаях назначаемый в виде монотерапии.

Обоснованием включением в терапевтический комплекс противовирусных средств иммунного действия (интерферонов) является то, что клинические проявления инфекции обычно связаны с иммунодефицитными состояниями различной степени выраженности. При ВЭБ-инфекции всегда наблюдается сниженная выработка собственного интерферона.

Учитывая, что ВЭБ-инфекция является хроническим, персистирующим заболеванием, интерферонотерапия может быть рекомендована и в качестве профилактики обострений. В этом случае назначается курсовое лечение, длительность которого зависит от тяжести течения заболевания.

Из группы рекомбинантных интерферонов может назначаться препарат ВИФЕРОН® Суппозитории.

Сочетание основного действующего вещества интерферона альфа-2b и высокоактивных антиоксидантов: альфа-токоферола ацетата и аскорбиновой кислоты (в составе лекарственной формы представлена в виде смеси аскорбиновая кислота/натрия аскорбат) позволяет снизить терапевтически эффективную концентрацию интерферона альфа-2b и избежать проявления побочных эффектов интерферонотерапии. В присутствии аскорбиновой кислоты и ее соли и альфа-токоферола ацетата возрастает специфическая противовирусная активность интерферона, усиливается его иммуномодулирующее действие и нормализуются показатели интерферона.

Лечение ВЭБ-инфекции необходимо проводить под контролем клинического анализа крови (один раз в 7—14 дней), биохимического анализа (один раз в месяц, при необходимости чаще), иммунологического исследования — через один-два месяца.

Член-корр. РАЕН, профессор А.А. Халдин, д.м.н., президент НП «Герпес-Форум».

Источник: https://viferon.su/epshtejna-barr-virusnaya-infekciya/

Ранний, капсидный и ядерный антиген вируса Эпштейна-Барр

Диагностика патологий, ассоциированных с вирусом Эпштейна-Барр, подразумевает выявление уровня антител к ядерному антигену, капсидному и раннему.

Ядерный антиген вируса Эпштейна-Барр представляет один из белков вирусной частицы, наличие иммуноглобулинов к которому говорит о хронизации процесса, а присутствие их после реконвалесценции объясняется циркуляцией клеток памяти. Антитела к вирусу Эпштейна-Барр способствуют различию стадии и формы инфекции.

Общая характеристика патогенеза и антигенов ВЭБ

Вирус Эпштейна-Барр относится к 4 типу патогенов из семейства герпесвирусов, проявляет сродство к лимфоцитам, обладает онкогенными и иммунодепрессивными свойствами.

Структура Epstein-Barr virus сложная, поэтому при диагностике применяют несколько анализов для верификации ВЭБ в организме. Кроме того, исходя из выявленных показателей, удается определить давность инфицирования и форму инфекции.

Структура вириона представлена следующими, диагностически важными, белками:

• VСА – наружный или капсидный антиген;
• ЕВNА – внутренний или ядерный антиген;
• МА – антиген мембраны;
• ЕА – ранние (диффузный ЕАD и локализованный ЕАR).

В-клетки одними из первых принимают удар, а далее, вирус распространяется по остальной лимфатической системе.

Первое заражение вирусом сопровождается поражением 30% В-лимфоцитов. ДНК вируса Эпштейна-Барр поступает в клеточное ядро, при этом лимфоциты становятся «бессмертными»: несмотря на инфицирование, они непрерывно размножаются, что определяется присутствием атипичных мононуклеаров.

В период бессимптомного течения ВЭБ-инфекции вирион, персистирующий в лимфоцитах, экспрессирует ядерные и мембранные белки, что означает возникновение антител к указанным антигенам.

Ядерный антиген вируса Эпштейна-Барр провоцирует недоступность зараженных В-клеток для уничтожения иммунокомпетентными клетками.

В результате пораженные лимфоциты продолжают размножаться. Пролиферация их становится вирусзависимой.

В ответ на поражение В-лимфоцитов начинает активизироваться клеточное звено иммунитета, а именно Т-лимфоциты. Они тормозят избыточное размножение пораженных клеток, поэтому в анализах крови определяется лимфоцитоз, не только атипичные мононуклеары.

Цитотоксические иммунные клетки и киллеры (NK) сдерживают пул зараженных В-лимфоцитов, ограничивая патологический процесс, однако, погрешности иммунитета приводят к недостаточной атаке и постепенной пролиферации инфицированных человеческих клеток.

Поэтому при терапии инфекционного мононуклеоза и различных состояний, обусловленных ВЭБ-инфекцией, предпочтительно выполнить иммунограмму.

Во рту инфицированные клетки длительно локализуются в миндалинах, обуславливая выделение вирусных частиц с выдыхаемым воздухом, кашлем. ВЭБ покидает разрушенные В-лимфоциты для поражения новых.

Но описывают и иной тип паразитирования вируса Эпштейна-Барр в клеточных элементах – скрытый, когда образуется малое количество копий вируса, поддерживая тем самым носительство.

Вирус инфицирует не только В-клетки, но и ряд других клеток, несущих иммунную функцию, эпителиоциты сосудов. ДНК вируса в ядре может существовать в двух формах: кольцевая структура (эписома) или встроенная в геном.

Последняя приводит к хромосомным нарушениям, что лежит в основе онкологических заболеваний, ассоциированных с вирусом Эпштейна-Барр.

Важно!

В процессе размножения вируса образуется более 70 белков, но современные достижения медицины позволяют обнаружить антитела в крови у человека только к 4 антигенам ВЭБ.

Показатели крови к вирусу герпеса 4 типа расшифровываются следующим образом:

1. Ранний антиген вириона обеспечивает выработку антител в начале заражения или при обострении.
2. Капсидный антиген вируса Эпштейна-Барр характеризуется продукцией иммуноглобулинов в острой фазе начала патологии, при реактивации процесса. Особенностью считается наличие иммуноглобулинов к капсидному белку VCA как при обострении хронической инфекции, так и при ремиссии.
3. Антитела к ядерному белку вируса определяются при любой разновидности формы хронической патологии. После выздоровления от острой формы их наличие означает циркуляцию антител памяти: инфекция протекала ранее.
4. Антитела к мембранному антигену циркулируют при скрытом течении ВЭБ-инфекции.

Образуют структуру вириона капсидный, ядерный и мембранный антигены – они считаются уникальными или вирусоспецифическими.

Антитела IgG и IgM — что это?

Иммунная система человека в ответ на внедрение чужеродных агентов инфекционного происхождения реагирует продукцией специальных антител – иммуноглобулинов, которые инактивируют патогены.

Антитела классифицируются на несколько разновидностей, из которых для большинства инфекций актуально определение двух: M и G.

В чем разница антител IgM и IgG? Белки разновидности (класса) М продуцируются первыми в ответ на проникновение возбудителя или повторную реактивацию процесса. Антитела IgM к вирусу Эпштейна-Барр самоустраняются примерно спустя три месяца от начала болезни.

IgG продуцируются через несколько недель и определяются в крови всю жизнь, означая, что инфекция перенесена пациентом ранее.

IgG положительный – что это значит?

Вопрос возникает у многих людей, так как в рамках профилактического или диагностического обследования у взрослого человека будет такой результат с вероятностью ближе к 90%. Практически все взрослые люди инфицированы ВЭБ. Анализ означает, что инфекция перенесена.

При исследовании крови иммунохемилюминисцентным методом или ИФА выдают количественный результат, значения которого подразумевают отрицательный, сомнительный, положительный ответы.

Если получен сомнительный ответ, анализ крови повторяют через 7 дней. В случае второго сомнительного ответа анализ считают отрицательным.

Авидность позволяет установить срок давности заражения вирусным агентом. Авидность IgG к вирусу Эпштейна-Барр описывается большими значениями при давнем инфицировании, а низкое – говорит о свежем заболевании.

Расшифровка анализа на вирус Эпштейна-Барр помогает выяснить сроки попадания патогена в организм, форму инфекции.

Ранний антиген

Вскоре после поражения В-клеток в крови начинает формироваться пул иммуноглобулинов к раннему антигену. Когда уровень иммуноглобулинов достигает порогового уровня, их можно зафиксировать лабораторным методом.

Ранний антиген вируса Эпштейна-Барр не является структурным, он необходим для размножения вириона, к нему продуцируются антитела класса IgM и IgG.

Антитела IgM к раннему белку ВЭБ довольно рано формируются и так же быстро исчезают, поэтому выявить их зачастую не удается.

Это объясняется довольно длительным инкубационным сроком инфекционного мононуклеоза. Пока ВЭБ размножается в В-лимфоцитах в инкубации, симптомов не наблюдается.

Антитела IgG к раннему антигену начинают свою выработку уже при начавшейся симптоматике – в фазу разгара.

Таким образом, идентификация иммуноглобулинов к белку раннего типа является тестом ранней диагностики. При этом длительное сохранение антител IgG к ЕА говорит о хронизации, а рост считается маркером обострения.

Капсидный антиген

Антитела к капсидному антигену вируса Эпштейна-Барр IgM начинают формироваться по окончании инкубации (в начале патологии) и к моменту разгара клиники имеют значения, определяемые лабораторно.

Важно!

Антитела класса IgM на капсидный антиген положительные и определяются на максимуме в течение 1,5 месяцев от начала заболевания, через полгода они снижаются.

Если иммуноглобулины М на капсидную форму белка вируса Эпштейна-Барр положительные на протяжении больше 12 недель, подозревают затяжной мононуклеоз и иммунодефицит.

Таким образом, положительный результат анализа крови на IgM к капсидному антигену подтверждает острую инфекцию. IgG положительный на первом месяце болезни, а пик достигается на 8 неделе от момента развития клиники.

При отсутствии признаков положительный IgG на капсидный антиген к вирусу Эпштейна-Барр подтверждают, что инфекция перенесена. Эти иммуноглобулины называют клетками памяти.

Если анализ выполняют в течение всей инфекции и определяют постепенное нарастание значения антител IgG, то выставляют острую инфекцию первичного характера.

Если в крови пациента длительно присутствуют IgG к VCA и к ЕА, возрастает вероятность хронизации. Очень высокие уровни IgG к VCA могут указывать на  лимфому Беркитта и рак назофарингеальной области.

Ядерный антиген

Антитела к ядерному антигену EBNA начинают продуцироваться после патологии в период реконвалесценции. Определению в большинстве подлежат иммуноглобулины IgG.

Антитела к EBNA могут фиксироваться несколько лет после острого мононуклеоза. Возрастает их количество на третьем-двенадцатом месяце от момента начала болезни.

Следует знать, что отсутствие этих иммуноглобулинов при параллельной циркуляции антител IgM к VCA, а также антител IgG к ЕА, указывает на текущий инфекционный мононуклеоз.

Если ранее результат на EBNA был негативный, а затем стал положительный – предполагают существующую инфекцию.

При наличии клиники мононуклеоза или другой ВЭБ-патологии изредка отсутствие данных иммуноглобулинов к Эпштейна-Барр указывает на выраженный иммунодефицит.

Обнаружение в крови антител к EBNA классов IgM при негативных IgG показывает на острое инфицирование. Если соотношение обратное, то процесс считается перенесенным ранее.

Обнаружение ДНК

С целью непосредственного обнаружения вирусной ДНК в биоматериале больного применяют ПЦР. Благодаря этому способу удается выявить вирус в следующих образцах и:

• в слюне;
• в цервикальном канале;
• в секрете предстательной железы;
• в моче;
• в соскобе из уретры.

С помощью ПЦР удается обнаружить не менее 80 вирионов в 5 мкл биологической жидкости. Специфичность теста приближается к 100%.

Результат возможно расценить двояко. Положительный ПЦР в слюне на вирус Эпштейна-Барр свидетельствует о носительстве или заболевании. Если присутствует характерная клиника и результат ПЦР положительный, диагноз подтверждается.

ДНК Эпштейна-Барр удается зафиксировать в начале заболевания. Спонтанное выделение возбудителя при исключении наличия клиники указывает на носительство.

В слюне ДНК определяют в конце инкубации, в фазе разгара и в течение полугода после выздоровления.

ВЭБ могут определять качественно и количественно при лечении хронической формы, при иммунодефиците на фоне Эпштейна-Барр, при терапии опухолей, связанных с вирусом.

Определение DNA EBV (Эпштейн-Барр вируса) в количественном выражении необходимо для анализа эффективности лечения, так как количественная ПЦР позволяет выявить вирусную нагрузку.

Если со временем при терапии число копий снижается, тактика выбрана верно. В норме копий вируса в биоматериале быть не должно.

Диагностика ВЭБ-инфекции имеет большое значение при планировании беременности, у часто болеющих детей и взрослых, пожилых людей.

С целью выбора адекватной тактики лечения, идентифицируют антитела к белкам Эпштейна-Барр, а также определяют ДНК с помощью ПЦР. Анализы помогают выявить давность заражения и форму инфекции.

Куликовская Н.А., врач-инфекционист

Источник: https://pro-herpes.ru/virus-epshtejna-barr/antigen-virusa.html

Как сдавать ПЦР на вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) и для чего его делают

Анализ на вирус Эпштейна-Барр производится двумя способами: ИФА, который выявляет антитела к антигенам и устанавливает форму развития инфекции (хроническую, острую, бессимптомную), и ПЦР (полимерная цепная реакция).

Метод ПЦР на вирус Эпштейна-Барр исследует ДНК клеток вируса, определяет его наличие или отсутствие у человека.

ПЦР рекомендуется для обследования детей, так как организм ребёнка ещё не успевает выработать антитела, а также, когда результат ИФА вызывает сомнение.

Особенности проведения ПЦР

Вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) относится к самым распространённым заболеваниям, его носителями являются почти 65% детей до трёх лет, а также 97% взрослых. Это одна из разновидностей герпесвирусов (4-го типа), которая после заражения вызывает заболевания:

1. Лимфоретикулярной системы: изменение лимфатических узлов, поражение печени и селезёнки.
2. Иммунной системы: поселяется внутри В-лимфоцитов, нарушает их функциональные свойства, что вызывает иммунодефицит, вызывает разрушение клеточного звена иммунитета.
3. Эпителиальных клеток дыхательных и пищеварительных органов: проявляется респираторным синдромом, а именно кашлем, одышкой, «ложным крупом», возможно поражение внутренних органов.

Считается, что ВЭБ иногда является провоцирующим фактором развития злокачественных новообразований: лимфомы Бёркитта, рака носоглотки, лимфогранулематоза, хотя окончательных доказательств этого нет. Кроме того, наблюдается аллергия почти у каждого четвёртого носителя хронической ВЭБ-инфекции.

Вирус сохраняется в организме всю жизнь, он вызывает хроническую инфекцию, которая обостряется при возникновении благоприятных для неё условий.

Что такое ПЦР

Известны две разновидности ВЭБ, но серологически они ничем не отличаются. Заражение возможно от носителя в конце инкубационного периода, весь срок протекания болезни, в течение полугода со дня выздоровления. У отдельных больных имеется способность время от времени выделять вирус, то есть становиться его носителями даже спустя многие месяцы после инфицирования.

ПЦР-диагностика предполагает выявление ДНК вируса путём использования методов молекулярной биологии. Для исследования используются особые ферменты, которые многократно копируют фрагменты ДНК и РНК клеток. Затем полученные фрагменты сверяются с базой данных, выявляется присутствие ВЭБ и его концентрация.

Материалом при определении ДНК вируса Эпштейна-Барр становятся слюна, слизь из ротовой или носовой полости, кровь, пробы спинномозговой жидкости, соскобы клеток урогенитального канала, моча.

Целесообразность выбора того или иного материала определяется врачом. Обычно для ПЦР предпочтительна кровь, которую забирают в колбу с раствором ЭДТА (6%).

У маленького ребёнка иммунитет находится в стадии установления, поэтому метод определения антител к ним не применяется, для детей используется ПЦР.

Результат ПЦР часто бывает положительным, поэтому требуется дифференцировать больного человека и вирусоносителя, для этого применяется анализ с различной чувствительностью:

• до 10 копий на одну пробу – для носителей;
• до 100 копий – при активном вирусе Эпштейна-Барр.

ПЦР даёт очень высокую степень правильности результата, но особенность этого анализа состоит в том, что он информативен только в период репликации, потому присутствует 30% ложноотрицательных результатов по причине отсутствия репликации на момент анализа.

В период беременности считается обязательным несколько раз сдать анализ ПЦР, если вирус впервые выявлен уже после наступления беременности, для своевременного обнаружения реактивации вируса.

Подготовка к сдаче анализа

При сдаче анализа на вирус Эпштейна-Барр требуется исключить все факторы, которые могут исказить результат ПЦР:

1. Биологический материал необходимо брать утром натощак.
2. Накануне проведения ПЦР рекомендуется отказаться от плотного ужина. Лучше немного перекусить за 9 часов до времени взятия биоматериала.
3. За трое суток до сдачи анализа исключить алкоголь, энергетические напитки, жирную, сладкую или мучную пищу.
4. За день до анализа исключить чай и кофе, газированные напитки.

Перед анализом маленьким детям дают кипячённую воду (до 200 мл в течение получаса). Не рекомендуется принимать лекарства, начиная за 10-14 дней до ПЦР, но если они необходимы по жизненным показаниям, то их названия нужно предоставить врачу, который будет расшифровывать анализ.

Диагностика вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ): анализ крови, ДНК, ПЦР, печеночные пробы

Когда ПЦР будет готов

Известно несколько методик ПЦР-диагностики. Но самым достоверным и широко используемым стал анализ в реальном времени, при котором почти никогда не бывает ложноотрицательных показателей и доступен быстрый результат.

Результат ПЦР можно будет получить через несколько часов или несколько дней, все зависит от лаборатории и экстренности ситуации. Средняя продолжительность ожидания результата 1-2 дня.

Расшифровка ПЦР при вирусе Эпштейна-Барр

Самыми первыми причинами для назначения ПЦР являются превышение лейкоцитов, тромбоцитов и понижение нормы эритроцитов и гемоглобина крови. При выявлении таких показателей пациенту назначается дополнительная диагностика — ПЦР.

Результат исследования бывает положительным или отрицательным. Положительный результат ПЦР свидетельствует, что сдавший анализ человек — носитель ВЭБ, хотя его наличие не доказывает того, что присутствует инфекция в острой или хронической форме.

Это доказывает то, что ВЭБ когда-то проник внутрь организма, так как герпес характеризуется тем, что после первичного попадания в организм его уже ничем нельзя вывести из него.

Серология, ИФА, ПЦР при вирусе Эпштейна-Барр. Положительный и отрицательный результат

Отрицательный результат ПЦР обнаруживается, если человек не сталкивался с ВЭБ и не содержит его в своём организме.

Если требуется не только выявить присутствие вируса, но и определить стадию и форму заболевания, то назначается ИФА, анализ на антитела к антигенам ВЭБ, в ходе которого исследуются:

• антитела IgM VCA к капсидным антигенам вируса Эпштейна-Барр;
• IgG VCA — к ранним антигенам.

Присутствие и тех и других показывает, что заболевание находится в острой форме, потому что они исчезают в течение 4–6 недель после начала болезни.

ПЦР-диагностика считается молодым методом, но при этом достаточно достоверным. Выявить присутствие вируса возможно даже при наличии только одной молекулы днк-вируса.

Ввиду высокой точности данный вид обследования считается эффективным способом выявить герпесвирус и проследить за ходом лечения.

При этом ПЦР требует высокотехнологического оборудования с многоуровневой системой контроля и подготовленных специалистов.

Источник: https://herpes.center/gerpesvirus/pcr-dnk-ehpshtejna-barr-v-krovi

Антитела к вирусу Эпштейна-Барра: показания, анализ, расшифровка

Анализы крови к антителам назначаются достаточно часто. Они позволяют выявить вирусные и бактериальные поражения организма, даже если они протекают бессимптомно. Исследование крови на антитела к вирусу Эпштейна-Барра проводится по показаниям и не входит в комплекс мер, предусмотренных плановой диспансеризацией.

Что такое антитела к вирусу Эпштейна-Барра (ВЭБ)?

Возбудитель относится к группе герпесвирусов

Вирус Эпштейна-Барра относится к группе герпесвирусов. Он поражает лимфатическую систему, слизистые оболочки, ЦНС и практически все внутренние органы. Симптомов при поражении не возникает, и человек не подозревает об инфицировании.

Согласно международной статистике, вирусом поражены или перенесли его ранее каждые 9 человек из 10.

Если иммунитет в момент заражения находится в хорошем состоянии, то ВЭБ полностью уничтожается и формируется пожизненный иммунитет к инфекции.

Антитела против вируса вырабатываются иммунной системой человека. Они представляют собой иммуноглобулин (особый вид белка), который продуцируется клетками лимфоцитами. Их предназначение — связывание антигенов вируса. Для каждого антигена организм продуцирует свои антитела, из-за чего при анализе по наличию тех или иных белков удаётся установить заражение различными инфекциями.

Чем опасна ВЭБ-инфекция?

Инфекция может стать пусковым фактором рассеянного склероза

Опасность вируса заключается в том, что он приводит к снижению иммунитета и может быть основной причиной для начала развития аутоиммунных патологий и диабета. Инфекция способна вызвать врождённые уродства у ребёнка. Также, по мнению врачей, ВЭБ-инфекция, возможно является причиной, по которой развиваются следующие опасные патологии:

• рассеянный склероз,
• онкологические поражения,
• тяжёлые острые аллергии.

Кроме того, из-за влияния на работу иммунной системы вирус вызывает ослабление естественной защиты организма. Это приводит к значительному усложнению любых заболеваний и повышает риск развития осложнений большинства патологий и даже незначительных травм.

Показания к исследованию

Частые ОРИ — показание анализу

Проводится исследование крови на наличие антител к ВЭБ только по показаниям. Основными из них являются:

• наличие симптомов, позволяющих заподозрить мононуклеоз инфекционной природы, который всегда сопровождает поражение ВЭБ;
• частые вирусные инфекции, такие как грипп и ОРЗ;
• ангина, которая развивается 3 раза в год или чаще;
• простуда, при которой всегда отмечаются заметное увеличение в размерах лимфатических узлов и повышение температуры до высоких значений;
• разовое увеличение лимфатических узлов, гланд и аденоидов;
• период планирования беременности;
• наличие онкологических заболеваний;
• обнаружение ВИЧ инфекции.

Также в ряде случаев исследование крови на антитела к вирусу назначается при наличии синдрома хронической усталости.

Как подготовиться к исследованию

Накануне теста стоит минимизировать физическую активность

Для получения максимальной точности данных при анализе требуется подготовка к исследованию, которая заключается в следующем:

• отказ от каких-либо лекарственных препаратов за сутки до сдачи крови;
• отказ от алкоголя и табачных изделий за сутки до анализа;
• минимизация физических и эмоциональных нагрузок за 12 часов до сдачи материала;
• отказ от еды за 12 часов до анализа.

При необходимости специфической подготовки по индивидуальным показаниям рекомендации даёт врач, назначающий исследование крови на антитела.

Способы выявления антител к ВЭБ

Выявить антитела можно с помощью нескольких методик

Для выявления антител к вирусу могут быть использованы различные методы.

Гетерофильные антитела

При таком методе специфические гетерофильные антитела к ВЭБ определяются при помощи агглютинации с эритроцитами из крови барана, быка или лошади, которые прошли особую обработку.

Обнаружение данного вида антител возможно в течение полугода с момента инфицирования человека. Исследование проводится у взрослых и даёт точность результатов до 99%.

Для детей точность такого исследования только 30%.

Серологические исследования

Серологический тест информативен спустя 14 дней

При этом методе из сыворотки крови выделяются специализированные антитела против вируса. После инфицирования мононуклеозом наличие антител против ВЭБ выявляется через 2 недели с момента инфицирования. В ходе исследования проводят иммуноферментный анализ, а также применяют методы антикомплемант-флюоресценции и непрямой флуоресценции.

Антитела к раннему антигену

Ранний антиген и антитела к нему появляются первыми после момента заражения. Антигены обнаруживаются только в В-лимфоцитах и находятся в их цитоплазме. Обнаружение таких белков возможно ещё в инкубационном периоде. Выявление данных антител возможно в течение 6 месяцев с момента заражения.

Антитела к капсидному антигену

Антитела к капсидному антигену сохраняются пожизненно

Обнаружение антител к данному антигену является ценным диагностическим результатом. Они присутствуют в течение жизни, что позволяет выявлять переболевших вирусом даже через большой промежуток времени от момента инфицирования. После заражения определяются антитела только с 2 месяцев. Наличие данных антител указывает на устойчивость организма к ВЭБ.

Антитела к нуклеарному антигену

Выявить антитела к данному антигену возможно только на позднем этапе. Они указывают на то, что начался процесс активного выздоровления, но вирус ещё присутствует в организме. После болезни в течение длительного времени результат исследования на антитела к нуклеарному антигену может сохраняться положительным.

Расшифровка результатов

Результаты анализов интерпретирует врач

Расшифровку полученных в результате анализа данных проводит лечащий врач. Работники лаборатории не имеют права консультировать человека относительно результатов, и всё сказанное ими может расцениваться только как озвучивание показателей, но не врачебное заключение.

Ложноположительный результат

Нет метода, который был бы точным на 100%. Из-за этого возможно наличие ложноположительного результата. Основной причиной этого явления бывают нарушения в подготовке к исследованию и проведение анализа сразу после перенесённой болезни. Также исказить данные могут иные герпесвирусы.

При подозрении на неправильность результатов анализ проводят повторно через 2-3 недели.

Источник: https://gidanaliz.ru/analiz/immun/antitela-k-virusu-epshtejna-barra.html